pmedpharmФармация и фармакологияPharmacy & Pharmacology2307-92662413-2241Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute - branch of Volgograd State Medical Univer10.19163/2307-9266-2022-10-6-525-535pmedpharm-1218Research ArticleФАРМАКОЛОГИЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯPHARMACOLOGY AND CLINICAL PHARMACOLOGYСОЗДАНИЕ КЛОНА ЭМБРИОНАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК МЫШЕЙ С КОНДИЦИОННЫМ НОКАУТОМ ГУМАНИЗИРОВАННОГО ГЕНА SNCADEVELOPMENT OF MURINE STEM CELLS WITH CONDITIONAL KNOCKOUT OF HUMANIZED SNCA GENEhttps://orcid.org/0000-0002-8415-4562ПатрахановЕ. А.PatrakhanovE. A.

ассистент кафедры фармакологии и клинической фармакологии, ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» (НИУ «БелГУ»)

308015, Россия, г. Белгород, ул. Победы, д. 85

Assistant of the Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology, Belgorod State National Research University

85, Pobedy Str., Belgorod, Russia, 308015

pateval7@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-3138-2075ПокровскийВ. М.PokrovskyV. M.

ассистент кафедры фармакологии и клинической фармакологии, ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» (НИУ «БелГУ»)

308015, Россия, г. Белгород, ул. Победы, д. 85

Assistant of the Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology, Belgorod State National Research University

85, Pobedy Str., Belgorod, Russia, 308015

vmpokrovsky08@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0001-9440-5866КарагодинаА. Ю.KaragodinaA. Yu.

ассистент кафедры фармакологии и клинической фармакологии, ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» (НИУ «БелГУ»)

308015, Россия, г. Белгород, ул. Победы, д. 85

Assistant of the Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology, Belgorod State National Research University

85, Pobedy Str., Belgorod, Russia, 308015

karagodina75@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-6830-3820КраюшкинаА. М.KrayushkinaA. M.

ассистент кафедры фармакологии и клинической фармакологии, ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» (НИУ «БелГУ»). 

308015, Россия, г. Белгород, ул. Победы, д. 85

Assistant of the Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology, Belgorod State National Research University

85, Pobedy Str., Belgorod, Russia, 308015

annkrayushkina98@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-1969-3615ЖунусовН. С.ZhunusovN. S.

ассистент кафедры фармакологии и клинической фармакологии, ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» (НИУ «БелГУ»)

308015, Россия, г. Белгород, ул. Победы, д. 85

Assistant of the Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology, Belgorod State National Research University

85, Pobedy Str., Belgorod, Russia, 308015

nzhunu@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8151-6337ДейкинА. В.DeykinA. V.

кандидат биологических наук, доцент кафедры фармакологии и клинической фармакологии, ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» (НИУ «БелГУ»)

308015, Россия, г. Белгород, ул. Победы, д. 85

Candidate of Sciences (Biology), Associate Professor of the Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology, Belgorod State National Research University

85, Pobedy Str., Belgorod, Russia, 308015

deykin@bsu.edu.ruhttps://orcid.org/0000-0001-5402-0697КорокинМ. В.KorokinM. V.

доктор медицинских наук, доцент, профессор кафедры фармакологии и клинической фармакологии, ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» (НИУ «БелГУ»)

308015, Россия, г. Белгород, ул. Победы, д. 85

Doctor of Sciences (Medicine), Associate Professor, Professor of the Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology, Belgorod State National Research University

85, Pobedy Str., Belgorod, Russia, 308015

mkorokin@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-2761-6249ПокровскийМ. В.PokrovskyM. V.

доктор медицинских наук, профессор кафедры фармакологии и клинической фармакологии, руководитель НИИ Фармакологии живых систем, ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» (НИУ «БелГУ»)

308015, Россия, г. Белгород, ул. Победы, д. 85

octor of Sciences (Medicine), Professor of the Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology, Head of the Research Institute of Pharmacology of Living Systems, Belgorod State National Research University

85, Pobedy Str., Belgorod, Russia, 308015

mpokrovsky@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0003-4674-8797АлтуховаО. Б.AltukhovaO. B.

доктор медицинских наук, доцент, заведующий кафедрой акушерства и гинекологии медицинского института ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»(НИУ «БелГУ»)

308015, Россия, г. Белгород, ул. Победы, д. 85

Doctor of Sciences (Medicine), Associate Professor, Head of the Department of Obstetrics and Gynecology of the Medical Institute, Belgorod State National Research University

85, Pobedy Str., Belgorod, Russia, 308015

altuhova_o@bsu.edu.ruФедеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»РоссияBelgorod State National Research UniversityRussian Federation202212022023106525535Copyright © Патраханов Е.А., Покровский В.М., Карагодина А.Ю., Краюшкина А.М., Жунусов Н.С., Дейкин А.В., Корокин М.В., Покровский М.В., Алтухова О.Б., 20232023Патраханов Е.А., Покровский В.М., Карагодина А.Ю., Краюшкина А.М., Жунусов Н.С., Дейкин А.В., Корокин М.В., Покровский М.В., Алтухова О.Б.Patrakhanov E.A., Pokrovsky V.M., Karagodina A.Y., Krayushkina A.M., Zhunusov N.S., Deykin A.V., Korokin M.V., Pokrovsky M.V., Altukhova O.B.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmpharm.ru/jour/article/view/1218

Одним из ключевых молекулярных звеньев в патогенезе болезни Паркинсона является белок α-синуклеин. Накопленные данные свидетельствуют о том, что патогенные мутации в гене Snca ассоциированы с развитием нейродегенеративного повреждения головного мозга, тем самым указывая на актуальность изучения нейробиологической роли α-синуклеина.

Цель

Цель. Создание генетически-модифицированного клона стволовых клеток мышей с кондиционным нокаутом гуманизированного α-синуклеина, который может быть использован для реинъекции в мышиные бластоцисты, а также для фундаментальных и прикладных in vitro исследований в области патофизиологии и нейрофармакологии.

Материалы и методы

Материалы и методы. Для создания мышиных стволовых клеток с кондиционным нокаутом гуманизированного гена Snca был использован прежде полученный клон с фланкированным LoxP-сайтами первым экзоном Snca. Для гуманизации IV и V экзона была использована система CRISPR/Cas9-опосредованной гомологичной рекомбинации с донорными ДНК олигонуклеотидами человеческих сайтов соответствующих генов. Нуклеаза Cas9, гидовые РНК и донорная ДНК были трансфецированы в клетки мыши.

Результаты

Результаты. Нами был предложен и реализован подход к получению клонов мышиных генетически-модифицированных стволовых клеток, экспрессирующих патологический гуманизированный α-синуклеин. Полученные клоны были высеяны на чашки Петри для размножения и дальнейшего генетического анализа. Был обнаружен клон 126-2F4, несущий необходимые генетические модификации. Результаты проведенного исследования принципиально важны не только для понимания развития патологического процесса при α-синуклеинопатиях, но и, что ещё важнее, для разработки новых терапевтических подходов, которые позволят остановить распространение агрегационной патологии человеческого α-синуклеина по нервной системе и валидации этих подходов в доклинических испытаниях.

Заключение

Заключение. В результате проведенного исследования разработана стратегия CRISPR/Cas9-ассистированной гомологической рекомбинации в геноме эмбриональных стволовых клеток мыши для создания полностью гуманизированного гена Snca, кодирующего α-синуклеин. Выполнено редактирование генома клона эмбриональных стволовых клеток мыши с использованием CRISPR технологии. Синтезированы РНК и ДНК олигонуклеотиды, необходимые для создания рибонуклеопротеиновых комплексов, осуществляющих направленную гомологическую рекомбинацию в Snca локусе генома мыши. Разработанный клон клеток может служить для создания линии генетически-модифицированных мышей, служащих тест-системой для патофизиологических и нейрофармакологических исследований, связанных с синуклеинопатиями. При этом до индукции Cre-зависимой рекомбинации данная линия является репрезентативной моделью для исследования биологической роли мутантного Snca. В то же время, после Cre-зависимая активация нокаута позволяет имитировать фармакологическое ингибирование α-синуклеина, что представляет особый интерес для прикладных исследований в нейрофармакологии.

α-synuclein is one of the key molecular links in the pathogenesis of Parkinson’s disease. The accumulated data indicate that pathogenic mutations in the Snca gene are associated with the development of neurodegenerative brain damage, indicating the relevance of studying the synuclein neurobiological role.

The aim of the study was to create a genetically modified clone of mouse stem cells with a conditional knockout of humanized α-synuclein, which can be used for the reinjection into mouse blastocysts, as well as for basic and applied in vitro research in the field of pathophysiology and neuropharmacology.

Materials and methods

Materials and methods. To create mouse stem cells with a conditional knockout of the humanized Snca gene, a previously obtained clone with the first Snca exon flanked by LoxP sites, was used. The CRISPR/Cas9-mediated homologous recombination system with donor DNA oligonucleotides of the human sites of the corresponding gene sites was used to humanize the fourth and fifth exons. Cas9 nuclease, single guide RNA, and donor DNA were transfected into mouse cells.

Results

Results. An approach to obtaining clones of mouse genetically modified stem cells expressing pathological humanized α-synuclein, has been proposed and implemented. The resulting clones were plated on Petri dishes for propagation and a further genetic analysis. Clone 126-2F4 was found out carrying the necessary genetic modifications. The results obtained are fundamentally important not only for understanding the development of the pathological process in α-synucleinopathies, but which is more important, for the development of new therapeutic approaches that will stop the extension of the human α-synuclein aggregation pathology throughout the nervous system, and the validation of these approaches in preclinical trials.

Conclusion

Conclusion. As a result of the study, a strategy for CRISPR/Cas9-assisted homologous recombination in the genome of mouse embryonic stem cells has been developed to create a fully humanized Snca gene encoding α-synuclein, and the clone genome of mouse embryonic stem cells has been edited using a CRISPR technology. The RNA and DNA oligonucleotides necessary for the creation of RNP complexes that carry out a directed homologous recombination in the Snca locus of the mouse genome have been synthesized. The developed cell clone can serve to create a line of genetically modified mice that serve as a test system for pathophysiological and neuropharmacological studies associated with synucleinopathies. Herewith, before the induction of the Cre-dependent recombination, this line is a representative model for studying a biological role of mutant Snca. At the same time, after a Cre-dependent knockout activation, it is possible to imitate the pharmacological inhibition of α-synuclein, which is of particular interest for applied research in neuropharmacology.

α-синуклеиннейродегенерацияболезнь Паркинсонакондиционный нокаутCRISPR/Cas9α-synucleinneurodegenerationParkinson’s diseaseconditional knockoutCRISPR/Cas9Исследование проведено при финансовой поддержке Министерства науки и образования Российской Федерации (Приложение № 9 к Соглашению о субсидии № 075-15-2021-1346 от 04.10.2021).The study was conducted with the financial support of the Ministry of Science and Education of the Russian Federation (Appendix No. 9 to Subsidy Agreement No. 075-15-2021-1346 dated October 4, 2021).ReferencesCheckoway H., Lundin J.I., Kelada S.N. Neurodegenerative diseases // IARC Sci. Publ. – 2011. – P. 407–419.Checkoway H, Lundin JI, Kelada SN. Neurodegenerative diseases. IARC Sci Publ. 2011;(163):407–19.Bougea A. Synuclein in neurodegeneration // Adv. Clin. Chem. – 2021. – Vol. 103. – P. 97–134. DOI: 10.1016/bs.acc.2020.08.007Bougea A. Synuclein in neurodegeneration. Adv Clin Chem. 2021;103:97–134. DOI: 10.1016/bs.acc.2020.08.007Ozansoy M., Başak A.N. The central theme of Parkinson’s disease: α-synuclein // Mol Neurobiol. – 2013. – Vol. 47, No. 2. – P. 460–465. DOI: 10.1007/s12035-012-8369-3Ozansoy M, Başak AN. The central theme of Parkinson’s disease: α-synuclein. Mol Neurobiol. 2013 Apr;47(2):460–5. DOI: 10.1007/s12035-012-8369-3George J.M. The synucleins // Genome Biol. – 2002. – Vol. 3, No. 1. – Art. ID: 3002. DOI: 10.1186/gb-2001-3-1-reviews3002George JM. The synucleins. Genome Biol. 2002;3(1):REVIEWS3002. DOI: 10.1186/gb-2001-3-1-reviews3002Breydo L., Wu J.W., Uversky V.N. Α-synuclein misfolding and Parkinson’s disease // Biochim. Biophys. Acta. – 2012. – Vol. 1822, No. 2. – P. 261–285. DOI: 10.1016/j.bbadis.2011.10.002Breydo L, Wu JW, Uversky VN. Α-synuclein misfolding and Parkinson’s disease. Biochim Biophys Acta. 2012 Feb;1822(2):261–85. DOI: 10.1016/j.bbadis.2011.10.002Iwai A., Masliah E., Yoshimoto M., Ge N., Flanagan L., de Silva H.A., Kittel A., Saitoh T. The precursor protein of non-A beta component of Alzheimer’s disease amyloid is a presynaptic protein of the central nervous system // Neuron. – 1995. – Vol. 14, No. 2. – P. 467–475. DOI: 10.1016/0896-6273(95)90302-xIwai A, Masliah E, Yoshimoto M, Ge N, Flanagan L, de Silva HA, Kittel A, Saitoh T. The precursor protein of non-A beta component of Alzheimer’s disease amyloid is a presynaptic protein of the central nervous system. Neuron. 1995 Feb;14(2):467–75. DOI: 10.1016/0896-6273(95)90302-xLee S.J., Jeon H., Kandror K.V. Alpha-synuclein is localized in a subpopulation of rat brain synaptic vesicles // Acta Neurobiol. Exp. (Wars). – 2008. – Vol. 68, No. 4. – P. 509–515.Lee SJ, Jeon H, Kandror KV. Alpha-synuclein is localized in a subpopulation of rat brain synaptic vesicles. Acta Neurobiol Exp (Wars). 2008;68(4):509–15.Lashuel H.A., Overk C.R., Oueslati A., Masliah E. The many faces of α-synuclein: from structure and toxicity to therapeutic target // Nat. Rev. Neurosci. – 2013. – Vol. 14, No. 1. – P. 38–48. DOI: 10.1038/nrn3406Lashuel HA, Overk CR, Oueslati A, Masliah E. The many faces of α-synuclein: from structure and toxicity to therapeutic target. Nat Rev Neurosci. 2013 Jan;14(1):38–48. DOI: 10.1038/nrn3406Dalfó E., Ferrer I. Alpha-synuclein binding to rab3a in multiple system atrophy // Neurosci. Lett. – 2005. – Vol. 380, No. 1–2. – P. 170–175. DOI: 10.1016/j.neulet.2005.01.034Dalfó E, Ferrer I. Alpha-synuclein binding to rab3a in multiple system atrophy. Neurosci Lett. 2005 May 20-27;380(1-2):170–5. DOI: 10.1016/j.neulet.2005.01.034Burré J., Sharma M., Tsetsenis T., Buchman V., Etherton M.R., Südhof T.C. Alpha-synuclein promotes SNARE-complex assembly in vivo and in vitro // Science. – 2010. – Vol. 329, No. 5999. – P. 1663–1667. DOI: 10.1126/science.1195227Burré J, Sharma M, Tsetsenis T, Buchman V, Etherton MR, Südhof TC. Alpha-synuclein promotes SNARE-complex assembly in vivo and in vitro. Science. 2010 Sep 24;329(5999):1663–7. DOI: 10.1126/science.1195227Ninkina N., Connor-Robson N., Ustyugov A.A., Tarasova T.V., Shelkovnikova T.A., Buchman V.L. A novel resource for studying function and dysfunction of α-synuclein: mouse lines for modulation of endogenous Snca gene expression // Sci. Rep. – 2015. – Vol. 5. – Art. ID: 16615. DOI: 10.1038/srep16615Ninkina N, Connor-Robson N, Ustyugov AA, Tarasova TV, Shelkovnikova TA, Buchman VL. A novel resource for studying function and dysfunction of α-synuclein: mouse lines for modulation of endogenous Snca gene expression. Sci Rep. 2015 Nov 13;5:16615. DOI: 10.1038/srep16615Roman A.Y., Limorenko G., Ustyugov A.A., Tarasova T.V., Lysikova E.A., Buchman V.L., Ninkina N. Generation of mouse lines with conditionally or constitutively inactivated Snca gene and Rosa26-stop-lacZ reporter located in cis on the mouse chromosome 6 // Transgenic Res. – 2017. – Vol. 26, No. 2. – P. 301–307. DOI: 10.1007/s11248-016-9995-8Roman AY, Limorenko G, Ustyugov AA, Tarasova TV, Lysikova EA, Buchman VL, Ninkina N. Generation of mouse lines with conditionally or constitutively inactivated Snca gene and Rosa26-stop-lacZ reporter located in cis on the mouse chromosome 6. Transgenic Res. 2017 Apr;26(2):301–7. DOI: 10.1007/s11248-016-9995-8Chaprov K.D., Lysikova E.A., Teterina E.V., Buchman V.L. Kinetics of alpha-synuclein depletion in three brain regions following conditional pan-neuronal inactivation of the encoding gene (Snca) by tamoxifen-induced Cre-recombination in adult mice // Transgenic Res. – 2021. – Vol. 30, No. 6. – P. 867–873. DOI: 10.1007/s11248-021-00286-3Chaprov KD, Lysikova EA, Teterina EV, Buchman VL. Kinetics of alpha-synuclein depletion in three brain regions following conditional pan-neuronal inactivation of the encoding gene (Snca) by tamoxifen-induced Cre-recombination in adult mice. Transgenic Res. 2021 Dec;30(6):867–73. DOI: 10.1007/s11248-021-00286-3Krüger R., Kuhn W., Müller T., Woitalla D., Graeber M., Kösel S., Przuntek H., Epplen J.T., Schöls L., Riess O. Ala30Pro mutation in the gene encoding alpha-synuclein in Parkinson’s disease // Nat. Genet. – 1998. – Vol. 18, No. 2. – P. 106–108. DOI: 10.1038/ng0298-106Krüger R, Kuhn W, Müller T, Woitalla D, Graeber M, Kösel S, Przuntek H, Epplen JT, Schöls L, Riess O. Ala30Pro mutation in the gene encoding alpha-synuclein in Parkinson’s disease. Nat Genet. 1998 Feb;18(2):106–8. DOI: 10.1038/ng0298-106Polymeropoulos M.H., Lavedan C., Leroy E., Ide S.E., Dehejia A., Dutra A., Pike B., Root H., Rubenstein J., Boyer R., Stenroos E.S., Chandrasekharappa S., Athanassiadou A., Papapetropoulos T., Johnson W.G., Lazzarini A.M., Duvoisin R.C., Di Iorio G., Golbe L.I., Nussbaum R.L. Mutation in the alpha-synuclein gene identified in families with Parkinson’s disease // Science. – 1997. – Vol. 276, No. 5321. – P. 2045–2047. DOI: 10.1126/science.276.5321.2045Polymeropoulos MH, Lavedan C, Leroy E, Ide SE, Dehejia A, Dutra A, Pike B, Root H, Rubenstein J, Boyer R, Stenroos ES, Chandrasekharappa S, Athanassiadou A, Papapetropoulos T, Johnson WG, Lazzarini AM, Duvoisin RC, Di Iorio G, Golbe LI, Nussbaum RL. Mutation in the alpha-synuclein gene identified in families with Parkinson’s disease. Science. 1997 Jun 27;276(5321):2045–7. DOI: 10.1126/science.276.5321.2045Angelova P.R., Choi M.L., Berezhnov A.V., Horrocks M.H., Hughes C.D., De S., Rodrigues M., Yapom R., Little D., Dolt K.S., Kunath T., Devine M.J., Gissen P., Shchepinov M.S., Sylantyev S., Pavlov E.V., Klenerman D., Abramov A.Y., Gandhi S. Alpha synuclein aggregation drives ferroptosis: an interplay of iron, calcium and lipid peroxidation // Cell Death Differ. – 2020. – Vol. 27, No. 10. – P. 2781–2796. DOI: 10.1038/s41418-020-0542-zAngelova PR, Choi ML, Berezhnov AV, Horrocks MH, Hughes CD, De S, Rodrigues M, Yapom R, Little D, Dolt KS, Kunath T, Devine MJ, Gissen P, Shchepinov MS, Sylantyev S, Pavlov EV, Klenerman D, Abramov AY, Gandhi S. Alpha synuclein aggregation drives ferroptosis: an interplay of iron, calcium and lipid peroxidation. Cell Death Differ. 2020 Oct;27(10):2781–96. DOI: 10.1038/s41418-020-0542-zAngelova P.R., Horrocks M.H., Klenerman D., Gandhi S., Abramov A.Y., Shchepinov M.S. Lipid peroxidation is essential for α-synuclein-induced cell death // J. Neurochem. – 2015. – Vol. 133, No. 4. – P. 582–589. DOI: 10.1111/jnc.13024Angelova PR, Horrocks MH, Klenerman D, Gandhi S, Abramov AY, Shchepinov MS. Lipid peroxidation is essential for α-synuclein-induced cell death. J Neurochem. 2015 May;133(4):582–9. DOI: 10.1111/jnc.13024Choi M.L., Chappard A., Singh B.P., Maclachlan C., Rodrigues M., Fedotova E.I., Berezhnov A.V., De S., Peddie C.J., Athauda D., Virdi G.S., Zhang W., Evans J.R., Wernick A.I., Zanjani Z.S., Angelova P.R., Esteras N., Vinokurov A.Y., Morris K., Jeacock K., Tosatto L., Little D., Gissen P., Clarke D.J., Kunath T., Collinson L., Klenerman D., Abramov A.Y., Horrocks M.H., Gandhi S. Pathological structural conversion of α-synuclein at the mitochondria induces neuronal toxicity // Nat. Neurosci. – 2022. – Vol. 25, No. 9. – P. 1134–1148. DOI: 10.1038/s41593-022-01140-3. Erratum in: Nat. Neurosci. – 2022. – Vol. 25, No. 11. – Art. ID: 1582.Choi ML, Chappard A, Singh BP, Maclachlan C, Rodrigues M, Fedotova EI, Berezhnov AV, De S, Peddie CJ, Athauda D, Virdi GS, Zhang W, Evans JR, Wernick AI, Zanjani ZS, Angelova PR, Esteras N, Vinokurov AY, Morris K, Jeacock K, Tosatto L, Little D, Gissen P, Clarke DJ, Kunath T, Collinson L, Klenerman D, Abramov AY, Horrocks MH, Gandhi S. Pathological structural conversion of α-synuclein at the mitochondria induces neuronal toxicity. Nat Neurosci. 2022 Sep;25(9):1134–48. DOI: 10.1038/s41593-022-01140-3. Epub 2022 Aug 30. Erratum in: Nat Neurosci. 2022 Nov;25(11):1582.Choi M.L., Gandhi S. Crucial role of protein oligomerization in the pathogenesis of Alzheimer’s and Parkinson’s diseases // FEBS J. – 2018. – Vol. 285, No. 19. – P. 3631–3644. DOI: 10.1111/febs.14587Choi ML, Gandhi S. Crucial role of protein oligomerization in the pathogenesis of Alzheimer’s and Parkinson’s diseases. FEBS J. 2018 Oct;285(19):3631–44. DOI: 10.1111/febs.14587Srinivasan E., Chandrasekhar G., Chandrasekar P., Anbarasu K., Vickram A.S., Karunakaran R., Rajasekaran R., Srikumar P.S. Alpha-Synuclein Aggregation in Parkinson’s Disease // Front. Med. (Lausanne). – 2021. – Vol. 8. – Art. ID: 736978. DOI: 10.3389/fmed.2021.736978Srinivasan E, Chandrasekhar G, Chandrasekar P, Anbarasu K, Vickram AS, Karunakaran R, Rajasekaran R, Srikumar PS. Alpha-Synuclein Aggregation in Parkinson’s Disease. Front Med (Lausanne). 2021 Oct 18;8:736978. DOI: 10.3389/fmed.2021.736978Chaprov K.D., Goloborshcheva V.V., Tarasova T.V., Teterina E.V., Korokin M.V., Soldatov V.O., Pokrovskiy M.V., Kucheryanu V.G., Morozov S.G., Ovchinnikov R.K. Increased Expression of the Multimerin-1 Gene in α-Synuclein Knokout Mice // Dokl. Biol. Sci. – 2020. – Vol. 494, No. 1. – P. 260–263. DOI: 10.1134/S0012496620050014Chaprov KD, Goloborshcheva VV, Tarasova TV, Teterina EV, Korokin MV, Soldatov VO, Pokrovskiy MV, Kucheryanu VG, Morozov SG, Ovchinnikov RK. Increased Expression of the Multimerin-1 Gene in α-Synuclein Knokout Mice. Dokl Biol Sci. 2020 Sep;494(1):260–3. DOI: 10.1134/S0012496620050014Soldatov V.O., Kubekina M.V., Silaeva Yu.Yu., Bruter A.V., Deykin A.V. On the way from SARS-CoV-sensitive mice to murine COVID-19 model // Research Results in Pharmacology. – 2022. – Vol. 6, No. 2. – P. 1–7. DOI: 10.3897/rrpharmacology.6.53633Soldatov VO, Kubekina MV, Silaeva YuYu, Bruter AV, Deykin AV. On the way from SARS-CoV-sensitive mice to murine COVID-19 model. Research Results in Pharmacology. 2020;6(2):1–7. DOI: 10.3897/rrpharmacology.6.53633Bruter A.V., Korshunova D.S., Kubekina M.V., Sergiev P.V., Kalinina A.A., Ilchuk L.A., Silaeva Y.Y., Korshunov E.N., Soldatov V.O., Deykin A.V. Novel transgenic mice with Cre-dependent co-expression of GFP and human ACE2: a safe tool for study of COVID-19 pathogenesis. Transgenic Res. 2021 Apr 14;30(3):289–301. DOI: 10.1007/s11248-021-00249-8. Epub ahead of print.Bruter AV, Korshunova DS, Kubekina MV, Sergiev PV, Kalinina AA, Ilchuk LA, Silaeva YY, Korshunov EN, Soldatov VO, Deykin AV. Novel transgenic mice with Cre-dependent co-expression of GFP and human ACE2: a safe tool for study of COVID-19 pathogenesis. Transgenic Res. 2021 Apr 14;30(3):289–301. DOI: 10.1007/s11248-021-00249-8. Epub ahead of print.Кузубова Е.В., Радченко А.И., Покровский В.М., Патраханов Е.А., Новикова А.А., Степенко Ю.В., Дейкин А.В. Патологические состояния, ассоциированные с белком тау: механизмы развития и возможные биологические мишени для фармакологической коррекции тау-протеинопатии (обзор) // Научные результаты биомедицинских исследований. – 2022. – Т. 8, № 4. – С. 474–797. DOI: 10.18413/2658-6533-2022-8-4-0-6Kuzubova E.V., Radchenko A.I., Pokrovsky VM, Patrakhanov EA, Novikova AA, Stepenko YuV, Deikin AV. Pathological conditions associated with tau protein: mechanisms of development and possible biological targets for pharmacological correction of tau proteinopathy (review). Research Results in Biomedicine. 2022;8(4):474–94. DOI: 10.18413/2658-6533-2022-8-4-0-6.RussianDolskiy A.A., Gudymo A.S., Taranov O.S., Grishchenko I.V., Shitik E.M., Prokopov D.Y., Soldatov V.O., Sobolevskaya E.V., Bodnev S.A., Danilchenko N.V., Moiseeva A.A., Torzhkova P.Y., Bulanovich Y.A., Onhonova G.S., Ivleva E.K., Kubekina M.V., Belykh A.E., Tregubchak T.V., Ryzhikov A.B., Gavrilova E.V., Maksyutov R.A., Deykin A.V., Yudkin D.V. The Tissue Distribution of SARS-CoV-2 in Transgenic Mice With Inducible Ubiquitous Expression of hACE2 // Front. Mol. Biosci. – 2022. – Vol. 8. – Art. ID: 821506. DOI: 10.3389/fmolb.2021.821506Dolskiy AA, Gudymo AS, Taranov OS, Grishchenko IV, Shitik EM, Prokopov DY, Soldatov VO, Sobolevskaya EV, Bodnev SA, Danilchenko NV, Moiseeva AA, Torzhkova PY, Bulanovich YA, Onhonova GS, Ivleva EK, Kubekina MV, Belykh AE, Tregubchak TV, Ryzhikov AB, Gavrilova EV, Maksyutov RA, Deykin AV, Yudkin DV. The Tissue Distribution of SARS-CoV-2 in Transgenic Mice With Inducible Ubiquitous Expression of hACE2. Front Mol Biosci. 2022 Jan 18;8:821506. DOI: 10.3389/fmolb.2021.821506

The authors declare that there are no conflicts of interest present.