pmedpharmФармация и фармакологияPharmacy & Pharmacology2307-92662413-2241Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute - branch of Volgograd State Medical Univer10.19163/2307-9266-2023-11-3-240-254pmedpharm-1356Research ArticleОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯRESEARCH ARTICLEИзучение биотрансформации нового селективного ингибитора карбоангидразы II 4-(2-метил-1,3-оксазол-5-ил)-бензолсульфонамидаStudy of biotransformation of new selective carbonic anhydrase II inhibitor 4-(2-methyl-1,3-oxazole-5-yl)-benzenesulfonamidehttps://orcid.org/0000-0002-0032-0341ХохловА. Л.KhokhlovA. L.

доктор медицинских наук, профессор, академик РАН, заведующий кафедрой фармакологии и клинической фармакологии, ректор ФГБОУ ВО ЯГМУ Минздрава России. 

150000, Россия, г. Ярославль, ул. Революционная, д. 5

 

Doctor of Sciences (Medicine), Professor, Academician of The Russian Academy of Sciences, Head of the Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology, rector of Yaroslavl State Medical University.

5, Revolutsionnaya Str., Yaroslavl, Russia, 150000

al460935@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0066-7388ЯичковИ. И.YaichkovI. I.

кандидат фармацевтических наук, научный сотрудник отдела аналитической разработки и контроля качества Центра трансфера фармацевтических технологий им. М.В. Дорогова, ФГБОУ ВО ЯГПУ им. К.Д. Ушинского; научный сотрудник Института фармации ФГБОУ ВО ЯГМУ Минздрава России. 

150030, Россия, г. Ярославль, ул. Технопарковая, д. 11/2.

150000, Россия, г. Ярославль, ул. Революционная, д. 5.

Candidate of Sciences (Pharmacy), Researcher of the Department of Analytical Development and Quality Control of M.V. Dorogov Pharmaceutical Technology Transfer Center of Yaroslavl State Pedagogical University n.a. K.D. Ushinsky; Researcher of the Institute of Pharmacy of Yaroslavl State Medical University. 

Bldg 2, 11, Technoparkovaya Str., Yaroslavl, Russia, 150030

5, Revolutsionnaya Str., Yaroslavl, Russia, 150000

i.yaichkov@yspu.orghttps://orcid.org/0000-0002-4389-461XШетневА. А.ShetnevA. A.

кандидат химических наук, руководитель отдела фармацевтической разработки Центра трансфера фармацевтических технологий им. М.В. Дорогова, ФГБОУ ВО ЯГПУ им. К.Д. Ушинского. 

150030, Россия, г. Ярославль, ул. Технопарковая, д. 11/2

Candidate of Sciences (Chemistry), Head of the Department of Pharmaceutical Development of M.V. Dorogov Pharmaceutical Technology Transfer Center of Yaroslavl State Pedagogical University n.a. K.D. Ushinsky. 

a.shetnev@list.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1421-9236ИвановскийС. А.IvanovskiyS. A.

кандидат химических наук, руководитель отдела аналитической разработки и контроля качества Центра трансфера фармацевтических технологий им. М.В. Дорогова, ФГБОУ ВО ЯГПУ им. К.Д. Ушинского. 

150030, Россия, г. Ярославль, ул. Технопарковая, д. 11/2.

Candidate of Sciences (Chemistry), Head of the Department of Analytical Development and Quality Control of M.V. Dorogov Pharmaceutical Technology Transfer Center of Yaroslavl State Pedagogical University n.a. K.D. Ushinsky. 

5, Revolutsionnaya Str., Yaroslavl, Russia, 150000

main_engine@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0913-2571КорсаковМ. К.KorsakovM. K.

доктор химических наук, профессор кафедры химии, теории и методики преподавания химии, директор Центра трансфера фармацевтических технологий им. М.В. Дорогова, ФГБОУ ВО ЯГПУ им. К.Д. Ушинского. 

150030, Россия, г. Ярославль, ул. Технопарковая, д. 11/2.

Doctor of Sciences (Chemistry), Professor of the Department of Chemistry, Theory and Methods of Teaching Chemistry, Director of M.V. Dorogov Pharmaceutical Technology Transfer Center of Yaroslavl State Pedagogical University n.a. K.D. Ushinsky.

5, Revolutsionnaya Str., Yaroslavl, Russia, 150000

m.korsakov@yspu.orghttps://orcid.org/0000-0001-9701-9207ГасилинаО. А.GasilinaO. A.

инженер отдела фармацевтической разработки Центра трансфера фармацевтических технологий им. М.В. Дорогова, ФГБОУ ВО ЯГПУ им. К.Д. Ушинского.

150030, Россия, г. Ярославль, ул. Технопарковая, д. 11/2.

engineer of the Department of Pharmaceutical Development of M.V. Dorogov Pharmaceutical Technology Transfer Center of Yaroslavl State Pedagogical University n.a. K.D. Ushinsky. 

5, Revolutsionnaya Str., Yaroslavl, Russia, 150000

olgagasilina23@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4275-9037ВольхинН. Н.VolkhinN. N.

младший научный сотрудник отдела фармакологических исследований Центра трансфера фармацевтических технологий им. М.В. Дорогова, ФГБОУ ВО ЯГПУ им. К.Д. Ушинского. 

150030, Россия, г. Ярославль, ул. Технопарковая, д. 11/2.

junior research fellow of the Department of Pharmacological Studies of M.V. Dorogov Pharmaceutical Technology Transfer Center of Yaroslavl State Pedagogical University n.a. K.D. Ushinsky.

5, Revolutsionnaya Str., Yaroslavl, Russia, 150000

nnvolkhin@ysmu.ruhttps://orcid.org/0009-0007-8435-7689ПетуховС. С.PetukhovS. S.

инженер отдела фармакологических исследований Центра трансфера фармацевтических технологий им. М.В. Дорогова, ФГБОУ ВО ЯГПУ им. К.Д. Ушинского; младший научный сотрудник Института фармации ФГБОУ ВО ЯГМУ Минздрава России. 

150030, Россия, г. Ярославль, ул. Технопарковая, д. 11/2.

150000, Россия, г. Ярославль, ул. Революционная, д. 5.

engineer of the Department of Pharmacological Studies of M.V. Dorogov Pharmaceutical Technology Transfer Center of Yaroslavl State Pedagogical University n.a. K.D. Ushinsky; junior research fellow of the Institute of Pharmacy of Yaroslavl State Medical University. 

Bldg 2, 11, Technoparkovaya Str., Yaroslavl, Russia, 150030

5, Revolutsionnaya Str., Yaroslavl, Russia, 150000

sspp465@mail.ruФедеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Ярославский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияYaroslavl State Medical UniversityRussian Federation1. Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Ярославский государственный педагогический университет им. К.Д. Ушинского». 2. Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Ярославский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации.Россия1.Yaroslavl State Pedagogical University named after K.D. Ushinsky. 2.Yaroslavl State Medical UniversityRussian FederationФедеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Ярославский государственный педагогический университет им. К.Д. Ушинского»РоссияYaroslavl State Medical UniversityRussian Federation202320112023113240254Copyright © Хохлов А.Л., Яичков И.И., Шетнев А.А., Ивановский С.А., Корсаков М.К., Гасилина О.А., Вольхин Н.Н., Петухов С.С., 20232023Хохлов А.Л., Яичков И.И., Шетнев А.А., Ивановский С.А., Корсаков М.К., Гасилина О.А., Вольхин Н.Н., Петухов С.С.Khokhlov A.L., Yaichkov I.I., Shetnev A.A., Ivanovskiy S.A., Korsakov M.K., Gasilina O.A., Volkhin N.N., Petukhov S.S.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmpharm.ru/jour/article/view/1356Цель

Цель. Определение продуктов биотрансформации нового селективного ингибитора карбоангидразы II – 4-(2-метил-1,3-оксазол-5-ил)-бензолсульфонамида.

Материалы и методы

Материалы и методы. Исследование проводили на 3 крысах-самцах породы Wistar и 3 кроликах породы Советская шиншилла. Суспензию препарата вводили внутрибрюшинным способом крысам в дозировке 20 мг/кг, кроликам – в дозировке 1,6 мг/кг. Образцы крови животных отбирали до введения и через 1, 2, 4 и 24 ч после. У крыс также выполняли забор мочи до введения и в промежутки 0–4, 4–8 и 8–24 ч после. Идентификацию метаболитов в крови, моче и плазме осуществляли с помощью метода ВЭЖХ-МС/МС. Для хроматографического разделения использовали колонку Poroshell 120EC-C18 (50×3,0 мм, 2,7 мкм) с предколонкой Zorbax Eclipse Plus C18 (12,5×2,1 мм, 5,0 мкм). Предполагаемые метаболиты синтезировали, подтверждали их структуру методом ЯМР-спектроскопии и масс-спектрометрии высокого разрешения. Полученные вещества сопоставляли с идентифицированными в биологических жидкостях веществами по времени удерживания, основным MRM-переходам и масс-спектрам.

Результаты

Результаты. При анализе проб плазмы, крови и мочи обнаружен N-гидроксиметаболит, образовавшийся путём присоединения атома кислорода к молекуле препарата. Хроматографические пики данного соединения были идентифицированы на MRM-переходах 255→159, 255→117, 255→89 m/z на 7,2 мин анализа. Были синтезированы N-оксид 4-(2-метил-1,3-оксазол-5-ил)-бензолсульфонамида и N-гидрокси-4-(2-метил-1,3-оксазол-5-ил)-бензолсульфонамид, которые потенциально могли быть получены в процессе биотрансформации. В ходе подтверждающих ВЭЖХ-МС/МС-испытаний по совпадению времён удерживания, соотношения площадей пиков на основных MRM-переходах и масс-спектров установлено, что идентифицированный метаболит – N-гидроксипроизводное препарата. Хроматографические пики N-оксида, обнаруженные при анализе модельных смесей стандартного образца на MRM-переходах 255→175, 255→133, 255→89 m/z при времени удерживания 5,43 мин, отсутствовали в образцах животных.

Заключение

Заключение. Изучаемый препарат метаболизируется с образованием единственного метаболита N-гидрокси-4-(2-метил-1,3-оксазол-5-ил)-бензолсульфонамида. Данное соединение обнаружено в свежеотобранных пробах биологических жидкостей обоих видов животных. Структура метаболита подтверждена методом ВЭЖХ-МС/МС путём сравнения с синтезированным стандартным образцом.

The aim of the study was to determine biotransformation products of a new selective carbonic anhydrase II inhibitor – 4-(2-methyl-1,3-oxazole-5-yl)-benzenesulfonamide.

Materials and methods

Materials and methods. The study was conducted on 3 Wistar rats and 3 rabbits of the Soviet Chinchilla breed. The suspension of the drug was administered intraperitoneally to rats at a dosage of 20 mg/kg, to rabbits - at a dosage of 1.6 mg/kg. The animal blood samples were collected before the administration and 1, 2, 4, 24 h after. Urine sampling was also performed in the rats before the administration and in the intervals of 0–4, 4–8, 8–24 h after. The identification of metabolites in blood, urine and plasma was carried out using HPLC-MS/MS. Poroshell 120 C 18 column (50×3.0 mm, 2.7 µm) with a Zorbax Eclipse Plus C18 pre-column (12.5×2.1 mm, 5.0 µm) was used for the chromatographic separation. The assumed metabolites were synthesized, their structure was confirmed by the NMR spectroscopy method and a high-resolution mass spectrometry. The obtained substances were compared with the substances identified in biological fluids by retention time, the main MRM-transitions and mass spectra.

Results

Results. The N-hydroxymetabolite was revealed in the analyses of plasma, blood and urine samples which had been formed by the addition of an oxygen atom to the drug molecule. Chromatographic peaks of this compound were identified at the MRM-transitions of 255→159, 255→117, 255→89 m/z at the 7.2nd min of the analysis. The N-oxide of 4-(2-methyl-1,3-oxazole-5-yl)-benzenesulfonamide and N-hydroxy-4-(2-methyl-1,3-oxazole-5-yl)-benzenesulfonamide were synthesized; potentially, they could have been obtained during the biotransformation. During the confirmatory HPLC-MS/MS tests based on the coincidence of the retention times, the main MRM transitions and mass spectra, the ratio of the peak areas at the identified metabolite it was established that an N-hydroxy derivative. Chromatographic peaks of the N-oxide detected in the analysis of the model mixtures of the standard substance at the MRM-transitions of 255→175, 255→133, 255→89 m/z at the retention time of 5.43 min, were absent in the animal samples.

Conclusion

Conclusion. The studied drug is metabolized to form a single metabolite of N-hydroxy-4-(2-methyl-1,3-oxazole-5-yl)-benzenesulfonamide. This compound was found in freshly collected samples of biological fluids of both animal species. The structure of the metabolite was confirmed by the HPLC-MS/MS-method by comparison with the synthesized standard substance.

биотрансформацияидентификация метаболитовселективный ингибитор карбоангидразы IIВЭЖХ-МС/МСN-гидроксисульфонамидbiotransformationmetabolite identificationselective carbonic anhydrase II inhibitorHPLC-MS/MSN-hydroxysulfonamideИсследование биотрансформации (биоаналитическая часть и эксперимент на животных) выполнена за счёт средств государственного задания Министерства здравоохранения Российской Федерации «Разработка лекарственного препарата для лечения остроугольной глаукомы» (№ 1022051100011-8-3.1.5;3.2.17). Синтез лекарственного вещества и его метаболитов выполнен за счет гранта Министерства просвещения Российской Федерации «Разработка инновационного лекарственного средства для лечения открытоугольной глаукомы путем селективного ингибирования карбоангидразы II» № 073-00077-21-02 (реестровая запись № 730000Ф.99.1.БВ10АА00006).The biotransformation study (bioanalytical part and animal experiment) was carried out using the funds of the state task of the Ministry of Health of the Russian Federation «Development of a drug for the treatment of acute-angle glaucoma» (No. 1022051100011-8-3.1.5;3.2.17). The synthesis of the medicinal substance and its metabolites has been performed at the expense of the grant of the Ministry of Education of the Russian Federation «Development of an innovative drug for the treatment of open-angle glaucoma by selective inhibition of carbonic anhydrase II» No. 073-00077-21-02 (register No. 730000F.99.1.BV10АА00006).ReferencesЕфимова Ю.А., Шетнев A.A., Гасилина O.A., Корсаков M.K. Эффективный путь синтеза 4-(2-метил-1,3-оксазол-5-ил)-бензолсульфонамида – перспективного противоглаукомного агента нового поколения // Бутлеровские сообщения. – 2022. – Т. 72, № 12. – С. 15–20. DOI: 10.37952/ROI-jbc-01/22-72-12-15Efimova JA, Shetnev AA, Gasilina OA. Korsakov MK. The efficient route for the synthesis of 4-(2-methyl-1,3-oxazole-5- yl)-benzenesulfonamide – a promising new generation antiglaucoma agent. Butlerov Communications. 2022;72(12):15–20. DOI: 10.37952/ROI-jbc-01/22-72-12-15. RussianИвановский С.А., Веселова В.Н., Шетнев А.А., Корсаков М.К. Разработка и валидация методики количественного определения 4-(2-метил-1,3-оксазол-5-ил)бензолсульфонамида – лекарственного кандидата для лечения глаукомы // Бутлеровские сообщения. – 2022. – Т. 72, № 12. – С. 139–146. DOI: 10.37952/ROI-jbc-01/22-72-12-139Ivanovsky SA, Veselova VN, Shetnev AA, Korsakov MK. Development and validation of a methodology for the quantitative determination of Oxazopt API. Butlerov Communications. 2022;72(12):139–46. DOI: 10.37952/ROI-jbc-01/22-72-12-139. RussianFerraroni M., Luccarini L., Masini E., Korsakov M., Scozzafava A., Supuran C.T., Krasavin M. 1,3-Oxazole-based selective picomolar inhibitors of cytosolic human carbonic anhydrase II alleviate ocular hypertension in rabbits: Potency is supported by X-ray crystallography of two leads // Bioorg Med Chem. – 2017. – Vol. 25, No. 17. – P. 4560–4565. DOI: 10.1016/j.bmc.2017.06.054Ferraroni M, Luccarini L, Masini E, Korsakov M, Scozzafava A, Supuran CT, Krasavin M. 1,3-Oxazole-based selective picomolar inhibitors of cytosolic human carbonic anhydrase II alleviate ocular hypertension in rabbits: Potency is supported by X-ray crystallography of two leads. Bioorg Med Chem. 2017;25(17):4560-5. DOI: 10.1016/j.bmc.2017.06.054Krasavin M., Korsakov M., Dorogov M., Tuccinardi T., Dedeoglu N., Supuran C.T. Probing the ‘bipolar’ nature of the carbonic anhydrase active site: aromatic sulfonamides containing 1,3-oxazol-5-yl moiety as picomolar inhibitors of cytosolic CA I and CA II isoforms // Eur J Med Chem. – 2015. – Vol. 101. – P. 334–347. DOI: 10.1016/j.ejmech.2015.06.022Krasavin M, Korsakov M, Dorogov M, Tuccinardi T, Dedeoglu N, Supuran CT. Probing the ‘bipolar’ nature of the carbonic anhydrase active site: aromatic sulfonamides containing 1,3-oxazol-5-yl moiety as picomolar inhibitors of cytosolic CA I and CA II isoforms. Eur J Med Chem. 2015 Aug 28;101:334-47. DOI: 10.1016/j.ejmech.2015.06.022Аладышева Ж.И., Беляев В.В., Береговых В.В., Бркич Г.Э., Грейбо С.В., Демина Н.Б., Джурко Ю.А., Ивановский С.А., Николенко Н.С., Комиссарова В.А., Корсаков М.К., Лаврентьева Л.И., Мешковский А.П., Мирошников А.Е., Онегин С.В., Парфенов А.А., Поздняков Н.О., Поройков В.В., Пятигорская Н.В., Пятигорский А.М., Раков А.А, Сидоров А.В., Спицкий О.Р., Трубников А.А., Хохлов А.А., Хохлов А.Л., Чикина И.В., Шабалина М.М., Шабров В.Н., Шитов Л.Н., Яичков И.И. Промышленная фармация. Путь создания продукта: монография / под ред. А.Л. Хохлова, Н.В. Пятигорской. – М.: РАН, 2019. – 394 с.Aladysheva ZhI, Belyaev VV, Beregovykh VV, Brkich GE, Greibo SV, Demina NB, Dzhurko YuA, Ivanovsky SA, Nikolenko NS, Komissarova VA, Korsakov MK, Lavrentieva LI, Meshkovsky AP, Miroshnikov AE, Onegin SV, Parfenov AA, Pozdnyakov NO, Poroikov VV, Pyatigorskaya NV, Pyatigorsky AM, Rakov AA, Sidorov AV, Spitsky OR, Trubnikov AA, Khokhlov AA, Khokhlov AL, Chikina IV, Shabalina MM, Shabrov VN, Shitov LN., Yaichkov II. Industrial Pharmacy: The Way to Create a Product: Monograph. Khokhlov AL, Pyatigorskaya NV, editors. Moscow: The Russian Scientific Academy; 2019, 394 p. RussianAlsibaee A.M., Aljohar H.I., Attwa M.W., Abdelhameed A.S., Kadi A.A. Investigation of fenebrutinib metabolism and bioactivation using MS3 methodology in ion trap LC/MS // Molecules. – 2023. – Vol. 28. – Art. ID: 4225. DOI: 10.3390/molecules28104225Alsibaee AM, Aljohar HI, Attwa MW, Abdelhameed AS, Kadi AA. Investigation of fenebrutinib metabolism and bioactivation using ms3 methodology in ion trap LC/MS. Molecules. 2023;28(10):4225. DOI: 10.3390/molecules28104225Geburek I., Schrenk D., These A. In vitro biotransformation of pyrrolizidine alkaloids in different species: part II—identification and quantitative assessment of the metabolite profile of six structurally different pyrrolizidine alkaloids // Arch Toxicol. – 2020. – Vol. 94, No. 11. – P. 3759–3774. DOI: 10.1007/s00204-020-02853-9Geburek I, Schrenk D, These A. In vitro biotransformation of pyrrolizidine alkaloids in different species: part II-identification and quantitative assessment of the metabolite profile of six structurally different pyrrolizidine alkaloids. Arch Toxicol. 2020;94(11):3759-74. DOI: 10.1007/s00204-020-02853-9Trawinski J., Wronski, M., Gawlik M., Skibinski R. Identification of the new metabolite of nebivolol using liquid chromatography coupled with high-resolution mass spectrometry and chemometrics // Molecules. – 2022. – Vol. 27, No. 3. – Art. ID: 763. DOI: 10.3390/ molecules27030763Trawiński J, Wroński M, Gawlik M, Skibiński R. Identification of the new metabolite of nebivolol using liquid chromatography coupled with high-resolution mass spectrometry and chemometrics. Molecules. 2022;27(3):763. doi: 10.3390/molecules27030763Peeters L., Vervliet P., Foubert K., Hermans N., Pieters L., Covaci A. A comparative study on the in vitro biotransformation of medicagenic acid using human liver microsomes and S9 fractions // Chemico-Biological Interactions. – 2020. – Vol. 328. – Art. ID: 109192. DOI: 10.1016/j.cbi.2020.109192Peeters L, Vervliet P, Foubert K, Hermans N, Pieters L, Covaci A. A comparative study on the in vitro biotransformation of medicagenic acid using human liver microsomes and S9 fractions. Chemico-Biological Interactions. 2020;328:109192. DOI: 10.1016/j.cbi.2020.109192Boyce M., Favela K.A., Bonzo J.A., Chao A., Lizarraga L.E., Moody L.R., Owens E.O., Patlewicz G., Shah I., Sobus J.R., Thomas R.S., Williams A.J., Yau A., Wambaugh J.F. Identifying xenobiotic metabolites with in silico prediction tools and LCMS suspect screening analysis // Front Toxicol. – 2023. – Vol. 5. – Art. ID: 1051483. DOI: 10.3389/ftox.2023.1051483Boyce M, Favela KA, Bonzo JA, Chao A, Lizarraga LE, Moody LR, Owens EO, Patlewicz G, Shah I, Sobus JR, Thomas RS, Williams AJ, Yau A, Wambaugh JF. Identifying xenobiotic metabolites with in silico prediction tools and LCMS suspect screening analysis. Front Toxicol. 2023;5:1051483. DOI: 10.3389/ftox.2023.1051483Chen W.H., Chiu C.H., Farn S.S., Cheng, K.H., Huang Y.R., Lee S.Y., Fang Y.C., Lin Y.H., Chang K.W. Identification of the hepatic metabolites of flumazenil and their kinetic application in neuroimaging // Pharmaceuticals. – 2023. – Vol.16. – Art. ID: 764. DOI: 10.3390/ph16050764Chen WH, Chiu CH, Farn SS, Cheng KH, Huang YR, Lee SY, Fang YC, Lin YH, Chang KW. Identification of the hepatic metabolites of flumazenil and their kinetic application in neuroimaging. Pharmaceuticals (Basel). 2023;16(5):764. DOI: 10.3390/ph16050764Walczak M., Suraj-Prażmowska J., Kuś K., Kij A., Groszek G. A preliminary metabolites identification of a novel compound with β-adrenolytic activity // Pharmacol Rep. – 2021. – Vol. 73, No. 5. – P. 1373–1389. DOI: 10.1007/s43440-021-00273-9Walczak M, Suraj-Prażmowska J, Kuś K, Kij A, Groszek G. A preliminary metabolites identification of a novel compound with β-adrenolytic activity. Pharmacol Rep. 2021;73(5):1373–89. DOI: 10.1007/s43440-021-00273-9Al-Shakliah N.S., Attwa M.W., Alrabiah H., Kadi A.A. Identification and Characterization of In vitro, In vivo and Reactive Metabolites of Tandutinib using Liquid Chromatography Ion Trap Mass Spectrometry // Analytical Methods. – 2021. – Vol. 13, No. 3. – P. 399–410. DOI: 10.1039/d0ay02106gAl-Shakliah NS, Attwa MW, Alrabiah H, Kadi AA. Identification and characterization of in vitro, in vivo and reactive metabolites of tandutinib using liquid chromatography ion trap mass spectrometry. Analytical Methods. 2021;13(3):399–410. DOI: 10.1039/d0ay02106gBelinskaia D.A., Savelieva E.I., Karakashev G.V., Orlova O.I., Leninskii M.A., Khlebnikova N.S., Shestakova N.N., Kiskina A.R. Investigation of bemethyl biotransformation pathways by combination of LC–MS/HRMS and in silico methods // Int J Mol Sci. – 2021. – Vol. 22. – Art. ID: 9021. DOI: 10.3390/ijms22169021Belinskaia DA, Savelieva EI, Karakashev GV, Orlova OI, Leninskii MA, Khlebnikova NS, Shestakova NN, Kiskina AR. Investigation of bemethyl biotransformation pathways by combination of LC-MS/HRMS and in silico methods. Int J Mol Sci. 2021;22(16):9021. DOI: 10.3390/ijms22169021Levina I.S., Nazarov A.K., Nazarov G.V., Kulikova L.E., Kuznetsov Y.V., Dmitrenok A.S., Minin D.V., Aksenov A.V., Zavarzin I.V. In vivo study on biotransformation of pentacyclic analogs of progesterone: Identification of their metabolites by HPLC-MS method // J Steroid Biochem Mol Biol. – 2019. – Vol. 194. – Art. ID: 105436. DOI: 10.1016/j.jsbmb.2019.105436Levina IS, Nazarov AK, Nazarov GV, Kulikova LE, Kuznetsov YV, Dmitrenok AS, Minin DV, Aksenov AV, Zavarzin IV. In vivo study on biotransformation of pentacyclic analogs of progesterone: Identification of their metabolites by HPLC-MS method. J Steroid Biochem Mol Biol. 2019;194:105436. DOI: 10.1016/j.jsbmb.2019.105436Sun Z., Yang J., Liu L., Xu Y., Zhou L., Jia Q., Shi Y., Du X., Kang J., Zuo L. Pharmacokinetics and metabolite profiling of trepibutone in rats using ultra-high performance liquid chromatography combined with hybrid quadrupole-orbitrap and triple quadrupole mass spectrometers // Front Pharmacol. – 2019. – Vol. 10. – Art. ID: 1266. DOI: 10.3389/fphar.2019.01266Sun Z, Yang J, Liu L, Xu Y, Zhou L, Jia Q, Shi Y, Du X, Kang J, Zuo L. Pharmacokinetics and metabolite profiling of trepibutone in rats using ultra-high performance liquid chromatography combined with hybrid quadrupole-orbitrap and triple quadrupole mass spectrometers. Front Pharmacol. 2019;10:1266. DOI: 10.3389/fphar.2019.01266Zhu C., Wan M., Cheng H., Wang H., Zhu M., Wu C. Rapid detection and structural characterization of verapamil metabolites in rats by UPLC-MSE and UNIFI platform // Biomed Chromatogr. – 2020. – Vol. 34. – Art. ID: e4702. DOI: 10.1002/bmc.4702Zhu C, Wan M, Cheng H, Wang H, Zhu M, Wu C. Rapid detection and structural characterization of verapamil metabolites in rats by UPLC-MSE and UNIFI platform. Biomed Chromatogr. 2020;34(1):e4702. DOI: 10.1002/bmc.4702Lee K., Lee J.Y., Lee K., Jung C.-R., Kim M.J., Kim J.A., Yoo D.G., Shin E.J., Oh S.J. Metabolite profiling and characterization of LW6, a novel HIF-1α inhibitor, as an antitumor drug candidate in mice // Molecules. – 2021. – Vol. 26. – Art. ID: 1951. DOI: 10.3390/molecules26071951Lee K, Lee JY, Lee K, Jung CR, Kim MJ, Kim JA, Yoo DG, Shin EJ, Oh SJ. Metabolite profiling and characterization of LW6, a novel HIF-1α inhibitor, as an antitumor drug candidate in mice. Molecules. 2021;26(7):1951. DOI: 10.3390/molecules26071951Reddy G.N., Laltanpuii C., Sonti R. Review on in vivo profiling of drug metabolites with LC-MS/MS in the past decade // Bioanalysis. – 2021. – Vol. 13, No. 22. – P. 1697–1722. DOI: 10.4155/bio-2021-0144.Reddy GN, Laltanpuii C, Sonti R. Review on in vivo profiling of drug metabolites with LC-MS/MS in the past decade. Bioanalysis. 2021;13(22):1697–722. DOI: 10.4155/bio-2021-0144Alseekh S. , Aharoni A., Brotman Y., Contrepois K., D’Auria J., Ewald J., C Ewald J., Fraser P.D., Giavalisco P., Hall R.D., Heinemann M., Link H., Luo J., Neumann S., Nielsen J., Perez de Souza L., Saito K., Sauer U., Schroeder F.C., Schuster S., Siuzdak G., Skirycz A., Sumner L.W., Snyder M.P., Tang H., Tohge T., Wang Y., Wen W., Wu S., Xu G., Zamboni N., Fernie A.R. Mass spectrometry-based metabolomics: a guide for annotation, quantification and best reporting practices // Nature Methods. – 2021. – Vol. 18, No. 7. – P. 747–756. DOI: 10.1038/s41592-021-01197-1Alseekh S, Aharoni A, Brotman Y, Contrepois K, D’Auria J, Ewald J, C Ewald J, Fraser PD, Giavalisco P, Hall RD, Heinemann M, Link H, Luo J, Neumann S, Nielsen J, Perez de Souza L, Saito K, Sauer U, Schroeder FC, Schuster S, Siuzdak G, Skirycz A, Sumner LW, Snyder MP, Tang H, Tohge T, Wang Y, Wen W, Wu S, Xu G, Zamboni N, Fernie AR. Mass spectrometry-based metabolomics: a guide for annotation, quantification and best reporting practices. Nat Methods. 2021;18(7):747–56. DOI: 10.1038/s41592-021-01197-1Хохлов А.Л., Рыска М., Кукес В.Г., Писачкова М., Печена М., Яворский А.Н., Шитов Л.Н., Джурко Ю.А., Ромодановский Д.П., Шитова А.М., Корсаков М.К., Лилеева Е.Г., Хохлов А.А., Поздняков Н.О., Мирошников А.Е., Воронина Е.А., Рыбачкова Ю.В., Яичков И.И. Современные подходы к проведению биоаналитических исследований при создании лекарственных препаратов: монография / под ред. А.Л. Хохлова. – М.: РАН, 2018. – 243 с.Khokhlov AL, Ryska M, Kukes VG, Pisachkova M, Pechena M, Yavorsky AN, Shitov LN, Dzhurko YuA, Romodanovsky DP, Shitova AM, Korsakov MK, Lileeva EG, Khokhlov AA, Pozdnyakov NO, Miroshnikov AE, Voronina EA, Rybachkova YuV, Yaichkov II. Modern approaches to conducting bioanalytical research in the creation of drugs: monograph. Khokhlov AL, editor; Moscow: The Russian Scientific Academy; 2018, 243 p. RussianLo Faro A.F., Tini A., Gottardi M., Pirani F., Sirignano A., Giorgetti R., Busard F.P. Development and validation of a fast ultra-high-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry method for determining carbonic anhydrase inhibitors and their metabolites in urine and hair // Drug Test Anal. – 2021. – Vol. 13, No. 8. – P. 1552–1560. DOI: 10.1002/dta.3055Lo Faro AF, Tini A, Gottardi M, Pirani F, Sirignano A, Giorgetti R, Busardò FP. Development and validation of a fast ultra-high-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry method for determining carbonic anhydrase inhibitors and their metabolites in urine and hair. Drug Test Anal. 2021;13(8):1552–60. DOI: 10.1002/dta.3055Dhandar A.G., Chaudhari S.R., Ganorkar S.B., Patil A.S., Surana S.J. Mini-Review on bioanalytical estimation of brinzolamide // Curr Pharmaceutic Analysis. – 2022. – Vol. 8, No. 3. – P. 265–272. DOI: 10.2174/1573412917666210812103414Dhandar AG, Chaudhari SR, Ganorkar SB, Patil AS, Surana SJ. Mini-Review on bioanalytical estimation of brinzolamide. Curr Pharmaceutic Analysis. 2022;18(3):265–72. DOI: 10.2174/1573412917666210812103414Mandour A., Nabil N., Zaazaa H.E., Abdelkawy M. Review on analytical studies of some pharmaceutical compounds containing heterocyclic rings: brinzolamide, timolol maleate, flumethasone pivalate, and clioquinol // Future J Pharmaceutic Sci. – 2020. – Vol.6. – Art. ID: 52. DOI: 10.1186/s43094-020-00068-4Mandour A, Nabil N, Zaazaa HE, Abdelkawy M. Review on analytical studies of some pharmaceutical compounds containing heterocyclic rings: brinzolamide, timolol maleate, flumethasone pivalate, and clioquinol. Future J Pharmaceutic Sci. 2020;6:52. DOI:10.1186/s43094-020-00068-4Begou O., Drabert K., Theodoridis G., Tsikas D. GC-NICI-MS analysis of acetazolamide and other sulfonamide (R-SO2-NH2) drugs as pentafluorobenzyl derivatives [R-SO2-N(PFB)2] and quantification of pharmacological acetazolamide in human urine // J Pharm Anal. – 2020. – Vol. 10, No. 1. – P. 49–59. DOI: 10.1016/j.jpha.2019.11.006Begou O, Drabert K, Theodoridis G, Tsikas D. GC-NICI-MS analysis of acetazolamide and other sulfonamide (R-SO2-NH2) drugs as pentafluorobenzyl derivatives [R-SO2-N(PFB)2] and quantification of pharmacological acetazolamide in human urine. J Pharm Anal. 2020;10(1):49–59. DOI: 10.1016/j.jpha.2019.11.006Карнакова П.К., Комаров Т.Н., Арчакова О.А., Щелгачева Д.С., Алешина А.В., Багаева Н.С., Карпова П.А., Шохин И.Е. Совместное определение кандесартана и гидрохлоротиазида в плазме крови человека методом ВЭЖХ-МС/МС // Разработка и регистрация лекарственных средств. – 2021. – Т. 10, № 4. – С. 177–189. DOI: 10.33380/2305-2066-2021-10-4-177-189Karnakova PK, Komarov TN, Archakova OA, Shchelgacheva DS, Aleshina AA, Bagaeva NS, Karpova PA, Shohin IE. Simultaneous determination of candesartan and hydrochlorothiazide in human plasma by HPLC-MS/MS. Drug Development & Registration. 2021;10(4):177–89. DOI: 10.33380/2305-2066-2021-10-4-177-189. RussianHaque A., Iqbal M., Alamoudi M.K., Alam P. A Selective and accurate LC-MS/MS method for simultaneous quantification of valsartan and hydrochlorothiazide in human plasma // Separations. – 2023. – Vol. 10. – Art. ID: 119. DOI: 10.3390/separations10020119Haque A, Iqbal M, Alamoudi MK, Alam P. A Selective and accurate LC-MS/MS method for simultaneous quantification of valsartan and hydrochlorothiazide in human plasma. Separations. 2023;10:119. DOI: 10.3390/separations10020119Ma Y., Modrzynski J.J., Yang Y., Aamand J., Zheng Y. Redox-dependent biotransformation of sulfonamide antibiotics exceeds sorption and mineralization: Evidence from incubation of sediments from a reclaimed water-affected river // Water Res. – 2021. – Vol. 205. – Art. ID: 117616. DOI: 10.1016/j.watres.2021.117616Ma Y, Modrzynski JJ, Yang Y, Aamand J, Zheng Y. Redox-dependent biotransformation of sulfonamide antibiotics exceeds sorption and mineralization: Evidence from incubation of sediments from a reclaimed water-affected river. Water Res. 2021;205:117616. DOI: 10.1016/j.watres.2021.117616Vree T.B., Hekster Y.A., Tijhuis M.W. Metabolism of sulfonamides // Antibiotics and Chemotherapy. Pharmacokinetics of Sulfonamides Revisited. – 1985. – Vol. 34. – P. 5–65. DOI: 10.1159/000410271Vree TB, Hekster YA, Tijhuis MW. Metabolism of Sulfonamides. Antibiotics and Chemotherapy. Pharmacokinetics of Sulfonamides Revisited. 1985;34:5–65. DOI: 10.1159/000410271

The authors declare that there are no conflicts of interest present.