pmedpharmФармация и фармакологияPharmacy & Pharmacology2307-92662413-2241Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute - branch of Volgograd State Medical Univer10.19163/2307-9266-2017-5-3-222-241pmedpharm-251Research ArticleФАРМАКОГНОЗИЯ, БОТАНИКАPHARMACOGNOSY, BOTANYРАЗРАБОТКА МЕТОДИК СТАНДАРТИЗАЦИИ СУХОГО ЭКСТРАКТА И ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ГИНКГО ДВУЛОПАСТНОГОDEVELOPMENT OF THE METHODS OF STANDARTIZATION DRY EXTRACT AND MEDICAL DRUGS GINKGO BILOBAМарченкоМ. А.MarchenkoM. A.

инженер-химик

chemical engineer

marchenko.mariya2018@yandex.ruЗилфикаровИ. Н.ZilfikarovI. N.

доктор фармацевтических наук, профессор РАН. Главный научный  сотрудник отдела фитохимии

Doctor of Sciences (Pharmacy), Professor

dagfarm@mail.ruИбрагимовТ. А,IbragimovT. A.

кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры аналитическойи фармацевтической химии

Candidate of Sciences (Pharmacy), Associate Professor of the Departmentof Analytical Chemistry and Pharmaceutical

aloefarm@mail.ruМалеевА. Г.MaleevA. G.

инженер-хроматографист

engineer hromatografist

alexx007_10@mail.ruЗАО «ВИФИТЕХ»РоссияCJSC «VIFITEH»Russian FederationЗАО «ВИФИТЕХ», ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений»РоссияCJSC «VIFITEH», All-Russian Science Research Institute of Medicinal and Aromatic PlantsRussian FederationФГБОУ ВО «Дагестанский государственный университет», ФГБОУ ВО «Дагестанский государственный медицинский университет»РоссияDagestan State University, Dagestan State Medical UniversityRussian Federation20172508201753222241Copyright © Марченко М.А., Зилфикаров И.Н., Ибрагимов Т.А., Малеев А.Г., 20172017Марченко М.А., Зилфикаров И.Н., Ибрагимов Т.А., Малеев А.Г.Marchenko M.A., Zilfikarov I.N., Ibragimov T.A., Maleev A.G.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmpharm.ru/jour/article/view/251

В статье представлены новые подходы к стандартизации сухого экстракта и лекарственных препаратов (ЛП) гинкго двулопастного (Ginkgo biloba L.). Предложены методики спектрофотометрического определения флавоноидов, терпенолактонов и гинкголевых кислот в активной фармацевтической субстанции(АФС) «Гинкго двулопастного экстракт сухой» (далее «экстракт гинкго»), а также методики анализа ЛП «Гинкго , таблетки, покрытые оболочкой, 40 мг» (далее «ГИНКГО, таблетки») и «Гинкго , раствор для приема внутрь, 40 мг/мл» (далее «ГИНКГО, раствор»). Цель работы – разработка и валидационная оценка методик стандартизации АФС растительного происхождения – экстракта гинкго, а также ЛП на его основе. Материалы и методы. Объектами исследования послужили образцы АФС «Гинкго двулопастного экстракт сухой», ЛП «Гинкго , таблетки» и «Гинкго , раствор», произведенные компанией ЗАО «ВИФИТЕХ» (Россия). Методы исследования: спектрофотометрия (далее «СФ-метрия») и высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ). Используемое оборудование: спектрофотометр СФ-56, производство ООО «ЛОМО-СПЕКТР» (Россия) и хроматограф жидкостный марки Shimadzu Prominence LC-20AD (Япония) с программным управлением и компьютерной обработкой результатов анализа. Результаты и обсуждение. Использование метода СФ-метрии оптимизирует процесс анализа не только в ходе стандартизации готового продукта, но и на всех стадиях промышленного производства ЛП в рамках  межоперационного контроля.Содержание суммы флавоноидов в образцах двух серий экстракта гинкго в пересчете на рутин составило мето-дом прямой СФ-метрии – (29,64 ± 0,36) % и (28,88 ± 0,54) %; методом дифференциальной СФ-метрии – (21,78± 0,41) и (20,98 ± 0,24) %. Содержание суммы флавоноидов в препаратах «Гинкго , таблетки» и «Гинкго ,раствор» составило: методом прямой СФ-метрии – (9,84 ± 0,15) мг/таб. и (10,07 ± 0,10) мг/мл; методом диф-ференциальной СФ-метрии – (7,33 ± 1,13) мг/таб. и (8,30 ± 0,13) мг/мл, соответственно. Проанализированыпрепараты-аналоги «Мемоплант » («Dr. Willimar Schwabe GmbH & Co. KG») и «Танакан ®» («BeaufourIpsen Industrie») – полученные результаты сопоставимы. Разработаны методики количественного опреде-ления в АФС суммы терпенолактонов методом дифференциальной СФ-метрии и остаточного содержаниясуммы гинкголевых кислот методом прямой СФ-метрии. В ходе их апробации было установлено, что коли-чество гинкголактонов в исследованных образцах составляет (7,87 ± 0,17) % и (8,03 ± 0,22)% в пересчетена билобалид, а остаточное содержание суммы гинкголевых кислот не превышает 10 ppm. Подтвержденацелесообразность и эффективность применения метода ВЭЖХ для одновременного определения подлинно-сти и оценки доброкачественности субстанции и ЛП гинкго. Заключение. Разработаны методики СФ-ме-трического количественного определения суммы флавоноидов в АФС и ЛП, полученных из листьев гинкгодвулопастного. Применительно к АФС предложены методики СФ-метрического определения суммы тер-пенолактонов и остаточного содержания суммы гинкголевых кислот. Разработанные методики отвечаютвалидационным критериям, характеризуются точностью и воспроизводимостью в сочетании с простотойисполнения и апробированы в условиях фармацевтического производства.

The article presents new approaches to standardization of dry extract and medicinal preparations (MD) of ginkgo bilobate. Methods for the spectrophotometric determination of flavonoids, terpenolactones and ginkgoic acids in the active pharmaceutical substance “Ginkgo biloba dry extract “ (further in the text “ginkgo extract”), as well as methods for analysis of MD “GINKGO, tablets coated with 40 mg” (“GINKGO”, Tablets) and “GINKGO, solution for enteral use, 40 mg/ml “(“GINKGO, solution”). The aim – development and validation of methods for standardization of plant-derived APS – ginkgo extract, as well as MD based on it. Materials and methods. The samples of the APS “Ginkgo biloba dry extract “, MD “GINKGO, tablets” and “GINKGO, solution”, produced by CJSC “VIFITEH” (Russia) served as the objects of the study. Research methods: spectrophotometry (further in the text “SF-metry”) and high-performance liquid chromatography (HPLC). Used equipment: SF-56 spectrophotometer manufactured by LLC “LOMO-SPECTR” (Russia) and liquid chromatograph of the brand Shimadzu Prominence LC-20AD (Japan) with software control and computer processing of analysis results. Results and discussion. The use of the method of SF-metry optimizes the analysis process not only during the standardization of the finished product, but also at all stages of industrial production of MD within the framework of interoperational control. The content of the sum of flavonoids in the samples of two series of ginkgo extract in terms of rutine was determined by direct SF-metry – (29.64 ± 0.36)% and (28.88 ± 0.54)%; method of differential SF-metry – (21.78 ± 0.41) and (20.98 ± 0.24)%. The content of the amount of flavonoids in the preparations “GINKGO, tablets” and “GINKGO, solution” was: by direct SF-metry – (9.84 ± 0.15) mg/tab. and (10.07 ± 0.10) mg/ml; Method of differential SF-metry – (7.33 ± 1.13) mg/tab. and (8.30 ± 0.13) mg/ml, respectively. The analogues “MEMOPLANT” (“Dr. Willimar Schwabe GmbH & Co. KG”) and “TANAKAN®” (“Beaufour Ipsen Industrie”) were analyzed – the results obtained are comparable. Methods for quantitative determination of the amount of terpenolactones in the APS by the method of differential SF-metry and the residual content of the sum of ginkgoic acids by the direct SF-metry method are developed. During their approbation it was found that the amount of ginkgolactones in the samples studied is 7.87 ± 0.17% and 8.03 ± 0.22%, calculated as bilobalide, and the residual content of ginkgoic acid does not exceed 10 ppm. The expediency and effectiveness of using the HPLC method for simultaneous determination of the authenticity and evaluation of the benign nature of the substance and MD ginkgo was confirmed. Conclusion. The methods of the SF metric quantification of the amount of funds have been developed. The developed methods meet the validation tests, are characterized by accuracy and reproducibility in combination with simplicity of execution and are tested in the conditions of pharmaceutical production.

гинкго экстрактгинкгофлавонгликозидытерпенолактоныгинкголевые кислотыспектрофотометрияGinkgo extractginkgofavonglycosidesterpenolactonesginkgolic acidsspectrophotometryReferencesГосударственный реестр лекарственных средств РФ. URL: grls.rosminzdrav.ru (дата обращения: 04.04.2017).Gosudarstvennyj reestr lekarstvennyh sredstv RF [State register of medicines of the Russian Federation]. URL: grls.rosminzdrav.ru (access data 04.04.2017) (In Russ.)Tan M.S., Yu J.T., Tan C.C., Wanq H.F., Menq X.F., Wanq C., Jiang T., Zhu X.C., Tan L. EFFICACY AND ADVERSE EFFECTS OF GINKGO BILOBA FOR COGNITIVE IMPAIRMENT AND DEMENTIA: A SYSTEMATIC REVIEW AND META-ANALYSIS // J. Alzheimers Dis. 2015. V. 43(2). P. 589-603. DOI: 10.3233/JAD-140837Tan M.S., Yu J.T., Tan C.C., Wanq H.F., Menq X.F., Wanq C., Jiang T., Zhu X.C., Tan L. EFFICACY AND ADVERSE EFFECTS OF GINKGO BILOBA FOR COGNITIVE IMPAIRMENT AND DEMENTIA: A SYSTEMATIC REVIEW AND META-ANALYSIS. J. Alzheimers Dis. 2015. V. 43(2). P. 589-603. DOI: 10.3233/ JAD-140837Онбыш Т.Е., Макарова Л.М., Погорелый В.Е. МЕХАНИЗМЫ РЕАЛИЗАЦИИ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЭКСТРАКТА ГИНКГО БИЛОБА // Современные наукоемкие технологии. 2005. №5. С. 22–25. URL: https://www.top-technologies.ru/ru/article/view?id=22912 (дата обращения: 04.04.2017).Onbysh T.E., Makarova L.M., Pogorely V.E. MEKHANIZMY REALIZACII FARMAKOLOGICHESKOJ AKTIVNOSTI EKSTRAKTA GINKGO BILOBA [MECHANISMS FOR THE REALIZATION OF THE PHARMACOLOGICAL ACTIVITY OF THE GINKGO BILOBA EXTRACT]. Sovremennye naukoemkie tekhnologii [Modern science-intensive technologies]. 2005. No 5. P. 22-25. URL: https://www.top-technologies.ru/ru/article/view?id=22912 (access data: 04.04.2017). (In Russ.)Корчагина Д.В., Куркина А.В., Дубищев А.В., Кочнева О.Н., Гусев Д.О. ИЗУЧЕНИЕ НЕЙРОТРОПНОЙ АКТИВНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ЛИСТЬЕВ ГИНКГО ДВУЛОПАСТНО- ГО // Фундаментальные исследования. 2013. № 10-4. С. 812-815. URL: https://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=32407 (дата обращения: 04.04.2017).Korchagin D.V., Kurkina A.V., Dubishchev A.V., Kochneva ON, Gusev D.O. IZUCHENIE NEJROTROPNOJ AKTIVNOSTI LEKARSTVENNYH PREPARATOV NA OSNOVE LISTEV GINKGO DVULOPASTNOGO [STUDY OF NEUROTROPIC ACTIVITY OF DRUGS BASED ON GINKGO LEAVES OF BILOBATE]. Fundamentalnye issledovaniya [Fundamental research]. 2013. No. 10-4. P. 812-815. URL: https://www.fundamental- research.ru/ru/article/view?id=32407 (access data: 04.04.2017). (In Russ.)Ковров Г.В., Палатов С.Ю., Лебедев М.А., Мачулина А.И. ИНСОМНИЯ И КОГНИТИВНЫЕ НАРУШЕНИЯ // Эффективная фармакотерапия. 2014. № 31. С. 28-33.Kovrov G.V., Palatov S.Y., Lebedev M.A., Machulina A.I. INSOMNIYA I KOGNITIVNYE NARUSHENIYA [INSOMNIA AND COGNITIVE IMPAIRMENT]. Effektivnaya farmakoterapiya [Effective pharmacotherapy]. 2014. No 31. P. 28-33. (In Russ.)Куркин В.А., Петрухина И.К. АКТУАЛЬНЫЕ АСПЕКТЫ СОЗДАНИЯ ИМПОРТОЗАМЕЩАЮЩИХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТИТЕЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ // Фундаментальные исследования. 2014. № 11. С.366-371. URL: https://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=35529 (дата обращения: 04.04.2017).Kurkin V.A., Petrukhin I.K. AKTUALNYE ASPEKTY SOZDANIYA IMPORTOZAMESHCHAYUSHCHIH LEKARSTVENNYH RASTITELNYH PREPARATOV [ACTUAL ASPECTS OF THE CREATION OF IMPORT-SUBSTITUTING HERBAL MEDICINES]. Fundamentalnye issledovaniya [Fundamental research].2014. No. 11. P. 366-371. URL: https://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=35529 ( access data:04.04.2017) (In Russ.)Эллер К.И., Балусова А.С., Комарова Е.Л. ОЦЕНКА ПОДЛИННОСТИ РАСТИТЕЛЬНЫХ ЭКСТРАКТОВ, КАК СЫРЬЯ ДЛЯ БАД GINKGO BILOBA –ГИНКГО БИЛОБА // Рынок БАД. 2005. №4. C.29-30.Eller K.I, Balusova A.S, Komarova E.L. OCENKA PODLINNOSTI RASTITELNYH EKSTRAKTOV KAK SYRYA DLYA BAD GINKGO BILOBA GINKGO BILOBA [EVALUATION OF AUTHENTICITY OF VEGETABLE EXTRACTS, AS RAW MATERIALS FOR BAD. GINKGO BILOBA – GINKGO BILOBA]. Rynok BAD [Market BAD]. 2005. No. 4. P.29-30. (In Russ.)Государственная Фармакопея Российской Федерации: в 3 т. XIII изд. М., 2015. URL: http://www.femb.ru/feml (дата обращения: 14.03.2017).Gosudarstvennaya Farmakopeya Rossijskoj Federacii v 3 t XIII izd [State Pharmacopoeia of the Russian Federation: 3 vol. XIII ed]. Moskva [Moscow], 2015. URL: http://www.femb.ru/feml (access data: 14.03.2017). (In Russ.)Sasakia K., Wada K., Haga M. CHEMISTRY AND BIOLOGICAL ACTIVITIES OF GINKGO BILOBA //Studies in Natural Products Chemistry. Vol. 28. Part I. 2003. P. 165-198. DOI: 10.1016/S1572-5995(03)80141-2Sasakia K., Wada K., Haga M. CHEMISTRY AND BIOLOGICAL ACTIVITIES OF GINKGO BILOBA // Studies in Natural Products Chemistry. Vol. 28. Part I. 2003. P. 165-198. DOI: 10.1016/S1572-5995(03)80141-2Шкляєв С.А., Підпружников Ю.В. Верифікація методики кількісного визначення гінкгофлавоноглікозидів в лікарському засобі, що містить екстракт Гінкго Білоба/ // Управління, економіка та забезпеченняякості. 2012. №. 3. С. 4-8.Shklyaev S.A., Pidpruzhnikov Y.V. VERIFIKACIYA METODIKI KILKISNOGO VIZNACHENNYA GINKGOFLAVONOGL KOZIDIV V LIKARSKOMU ZASOBI SHCHO MISTIT EKSTRAKT GINKGO BILOBA [VERIFICATION OF THE METHOD FOR THE QUANTITATIVE DETERMINATION OF GINKGO-FLAVONOGLYCOSIDIV IN A DRUG CONTAINING THE EXTRACT OF GINKGO BILOBA]. Upravlinnya ekonomika ta zabezpechennyayakosti [Management, Economics and Provision of Liquidity]. 2012. No. 3. P. 4-8 (In Ukr.)Sloley B.D., Tawfik S.R., Scherban K.A., Tam Y.K. QUALITY CONTROL ANALYSES FOR GINKGO EXTRACTS REQUIRE ANALYSIS OF INTACT FLAVONOL GLYCOSIDES // J. Food Drug Anal. 2003. Vol.11. No. 2. P. 102–107.Sloley B.D., Tawfik S.R., Scherban K.A., Tam Y.K. QUALITY CONTROL ANALYSES FOR GINKGO EXTRACTS REQUIRE ANALYSIS OF INTACT FLAVONOL GLYCOSIDES. J. Food Drug Anal. 2003. Vol.11. No. 2. P. 102–107.Дайронас Ж.В., Корочинский А.В., Зилфикаров И.Н. МИКРОСКОПИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ЭЛЕМЕНТОВ ЛИСТЬЕВ ГИНКГО ДВУЛОПАСТНОГО И ТРАВЫ ЛАБАЗНИКА ВЯЗОЛИСТНОГО В ТАБЛЕТКАХ «ГИНКГОТРОПИЛ» // Фармация и фармакология. 2016. Т.4. №1. С. 36-45. DOI: 10.19163/2307-9266-2016-4-1(14)-36-45Daironas Zh.V., Korochinsky A.V., Zilfikarov I.N. MICROSCOPY OF THE DIAGNOSTIC ELEMENTS OF THE LEAVES OF GINKGO BILOBATE AND GRASS OF THE MEADOWSWEED IN THE TABLETS “GINKGOTROPIL”. Pharmacy & Pharmacology. 2016. Vol. 4. No. 1. P. 36-45.Куркина А.В., Калабухова Е.А., Власова Г.И., Демидова Г.А., Авдеева Е.В. ОБОСНОВАНИЕ НОВЫХ ПОДХОДОВ К СТАНДАРТИЗАЦИИ ЛИСТЬЕВ ГИНКГО ДВУЛОПАСТНОГО С ПОМОЩЬЮ МЕТОДА ВЭЖХ // Современные проблемы науки и образования. 2013. № 4. С. 352. URL: https://www.scienceeducation. ru/ru/article/view?id=10016 (дата обращения: 04.04.2017).Kurkina A.V., Kalabukhova E.A., Vlasova G.I., Demidova G.A., Avdeev E.V. OBOSNOVANIE NOVYH PODHODOV K STANDARTIZACII LISTEV GINKGO DVULOPASTNOGO S POMOSHCHYU METODA VEZHKH [SUBSTANTIATION OF NEW APPROACHES TO THE STANDARDIZATION OF GINKGO BILOBATE LEAVES USING THE HPLC METHOD]. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya [Modern problems of science and education]. 2013. No. 4. P. 352. (In Russ.)Beek T.A. CHEMICAL ANALYSIS OF GINKGO BILOBA LEAVES AND EXTRACTS // Journal of Chromatography. 2002. Vol. 967. Is.1. P. 21-55. DOI: 10.1016/S0021-9673(02)00172-3Beek T.A. CHEMICAL ANALYSIS OF GINKGO BILOBA LEAVES AND EXTRACTS. Journal of Chromatography. 2002. Vol. 967. Is.1. P. 21-55. DOI: 10.1016/S0021-9673(02)00172-3Гинкго билоба (Ginkgo biloba L.) (Аналитический обзор). URL: http:// www.npkfarm.ru/dlya-spetsialistov/ginkgo-biloba-ginkgo-biloba-l-analiticheskiy-obzor.html (дата обращения 15.04.2017).Ginkgo biloba (Ginkgo biloba L.). Analiticheskij obzor [Ginkgo biloba (Ginkgo biloba L.) (Analytical review)]. URL: http: // www.npkfarm.ru/dlya-spetsialistov/ginkgo-biloba-ginkgo-biloba-l-analiticheskiy-obzor.html (access data: 15/05/2017). (In Russ.)Куркина А.В., Загоскина Н.В., Рязанова Т.К. СОСТАВ И СОДЕРЖАНИЕ ФЛАВОНОИДОВ В ЛИСТЬЯХ GINKGO BILOBA (GINKGOACEAE), КУЛЬТИВИРУЕМОГО В РАЗЛИЧНЫХ РЕГИОНАХ РОССИИ // Растительные ресурсы. 2013. Т. 49. № 3. С. 410-415.. Kurkina A.V, Zagoskina N.V., Ryanskova T.K. SOSTAV I SODERZHANIE FLAVONOIDOV V LISTYAH GINKGO BILOBA GINKGOACEAE KULTIVIRUEMOGO V RAZLICHNYH REGIONAH ROSSII [COMPOSITION AND CONTENT OF FLAVONOIDS IN THE LEAVES OF GINKGO BILOBA (GINKGOACEAE), CULTIVATED IN VARIOUS REGIONS OF RUSSIA]. Rastitelnye resursy [Vegetable resources]. 2013. Vol. 49. No. 3. P. 410-415. (In Russ.)Fuzzati N., Pace R., Villa F. A SIMPLE HPLC-UV METHOD FOR THE ASSAY OF GINKGOLIC ACIDS IN GINKGO BILOBA EXTRACTS // Fitoterapia. 2003. №74. P.247–256. DOI: 10.1016/S0367-326X(03)00040-6Fuzzati N., Pace R., Villa F. A SIMPLE HPLC-UV METHOD FOR THE ASSAY OF GINKGOLIC ACIDS IN GINKGO BILOBA EXTRACTS. Fitoterapia. 2003. №74. P.247–256. DOI: 10.1016/S0367-326X(03)00040-6United States Pharmacopeia. 31-th Ed. Rockville: United States Pharmacopoeial Convention. Inc., 2008.United States Pharmacopeia. 31-th Ed. Rockville: United States Pharmacopoeial Convention. Inc., 2008.Куркин В.А., Буланкин Д.Г., Даева Е.Д., Каденцев В.И. ФЛАВОНОИДЫ ЛИСТЬЕВ ГИНКГО ДВУЛОПАСТНОГО (GINKGO BILOBA L.) // Химия растительного сырья. 2012. №2. С. 85-88.Kurkin V.A., Bulankin D.G., Daeva E.D., Kadentsev V.I. FLAVONOIDY LISTEV GINKGO DVULOPASTNOGO GINKGO BILOBA L [FLAVONOIDS FROM THE LEAVES OF GINKGO BILOBA (GINKGO BILOBA L.)]. Himiya rastitelnogo syrya [Chemistry of plant raw materials]. 2012. No. 2. P. 85-88. (In Russ.)European Pharmacopoeia 7.0. 04/2008. P. 1531-1534.European Pharmacopoeia 7.0 04/2008: 1827. P. 1531-1534Орлова С.Е., Зилфикаров И.Н., Алиев А.М. СРАВНИТЕЛЬНОЕ ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СПИРТОВОГО И УГЛЕКИСЛОТНОГО ЭКСТРАКТОВ ПАЛЬМЫ САБАЛЯ // Химия растительного сырья. 2012. №4. С. 137-142.Orlova S.E, Zilfikarov I.N, Aliev A.M. SRAVNITELNOE FITOHIMICHESKOE ISSLEDOVANIE SPIRTOVOGO I UGLEKISLOTNOGO EKSTRAKTOV PALMY SABALYA [COMPARATIVE PHYTOCHEMICAL STUDY OF ALCOHOL AND CARBON DIOXIDE EXTRACTS OF THE PALM OF THE CABAL]. Himiya rastitelnogo syrya [Chemistry of plant raw materials]. 2012. No. 4. P. 137-142. (In Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.