pmedpharmФармация и фармакологияPharmacy & Pharmacology2307-92662413-2241Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute - branch of Volgograd State Medical Univer10.19163/2307-9266-2019-7-1-13-19pmedpharm-353Research ArticleФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ТЕХНОЛОГИЯ И БИОТЕХНОЛОГИЯPHARMACEUTICAL TECHNOLOGY AND BIOTECHNOLOGYРАЗРАБОТКА НОРМ КАЧЕСТВА ОБРАЗЦОВ МОДЕЛЬНОГО СОСТАВА ГРАНУЛИРОВАННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ С ГЛУТАТИОНОМ ВОССТАНОВЛЕННЫМWORKING OUT QUALITY STANDARDS OF MODEL COMPOSITION SAMPLES OF GRANULATED DOSAGE FORM WITH GLUTATHIONE RESTOREDhttps://orcid.org/0000-0002-0711-3505АлексееваК. А.AlekseevaK. A.

Алексеева Ксения Александровна – аспирант 3 года обучения, кафедра общей химии

308015, г. Белгород, ул. Победы, 85

Alekseeva Kseniya Aleksandrovna – post-graduate student, Pharmaceutical Chemistry and Pharmacognosy Department

85, Pobeda Str., Belgorod, 308015

740890@bsu.edu.ruhttps://orcid.org/0000-0002-2996-7712ПисаревД. И.PisarevD. I.

Писарев Дмитрий Иванович – доктор фармацевтических наук, доцент, профессор кафедры общей химии

Pisarev Dmitriy Ivanovich – PhD (Pharmacy), Associate Professor, Professor of General chemistry Department

85, Pobeda Str., Belgorod, 308015

pisarev@bsu.edu.ruhttps://orcid.org/0000-0001-6170-2151МалютинаА. Ю.MalyutinaA. Yu.

Малютина Анастасия Юрьевна – кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии

308015, г. Белгород, ул. Победы, 85

Malyutina Anastasiya Yurevna – PhD (Pharmacy), Associate Professor of Pharmaceutical Chemistry and Pharmacognosy Department

85, Pobeda Str., Belgorod, 308015

malyutina_a@bsu.edu.ruЖиляковаЕ. Т.ZhilyakovaE. T.

Жилякова Елена Теодоровна – доктор фармацевтических наук, профессор, заведующий кафедрой фармацевтической технологии

308015, г. Белгород, ул. Победы, 85

Zhilyakova Elena Teodorovna – Doctor of Sciences (Pharmacy), Professor, Head of Pharmaceutical Technology Department

85, Pobeda Str., Belgorod, 308015

ezhilyakova@bsu.edu.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6358-2680ЦветковаЗ. Е.TsvetkovaZ. E.

Цветкова Зоя Евгеньевна – ассистент кафедры фармацевтической технологии

308015, г. Белгород, ул. Победы, 85

Tsvetkova Zoya Evgenievna – Assistant,  Pharmaceutical  Technology  Department

85, Pobeda Str., Belgorod, 308015

tsvetkova_z@bsu.edu.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0123-9526ПолковниковаЮ. А.PolkovnikovaYu. A.

Полковникова Юлия Александровна – кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры фармацевтической химии и фармацевтической технологии394018, г. Воронеж, Университетская пл., 1

Yulia Aleksandrovna Polkovnikova –  PhD  (Pharmacy),  Associate  Professor

1, Universitetskaya Sq., Voronezh, 394006

Julipolk@mail.ruФГАОУ ВО НИУ «Белгородский государственный университет» Минобрнауки РоссииРоссияBelgorod State National Research UniversityRussian FederationФГБОУ ВО «Воронежский государственный университет» Минобрнауки РоссииРоссияVoronezh State UniversityRussian Federation201911032019711319Copyright © Алексеева К.А., Писарев Д.И., Малютина А.Ю., Жилякова Е.Т., Цветкова З.Е., Полковникова Ю.А., 20192019Алексеева К.А., Писарев Д.И., Малютина А.Ю., Жилякова Е.Т., Цветкова З.Е., Полковникова Ю.А.Alekseeva K.A., Pisarev D.I., Malyutina A.Y., Zhilyakova E.T., Tsvetkova Z.E., Polkovnikova Y.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmpharm.ru/jour/article/view/353

Биологически активные серосодержащие соединения (БАСС) проявляют ярко выраженные антиоксидантные свойства. Особое положение из числа данных соединений занимает глутатион восстановленный (GSH). Он представляет собой ключевое звено 3-х антиоксидантных систем организма из существующих четырех. Исходя из вышесказанного, нами была предложена лекарственная форма на основе GSH, обладающая антиоксидантными свойствами.

Целью данного исследования является разработка модельной гранулированной лекарственной формы на основе GSH и методики ее анализа с помощью предколоночной дериватизации ортофталевым альдегидом.

Материалы и методы

Материалы и методы. В качестве объекта исследования использовали GSH и гранулированную лекарственную форму на основе GSH, полученную методом влажного гранулирования. Оценку количественного содержания GSH вполученных гранулах, проводился с помощью предколоночной дериватизации методом обращено-фазной высокоэффективной хроматографии (ОФ ВЭЖХ). В качестве дериватизурующего агента использован орто-фталевый альдегид. Для обнаружения образовавшегося деривата был применен диодно-матричный детектор.

Результаты

Результаты. В ходе работы была создана модельная лекарственная форма – гранулы на основе GSH. Исходя из рекомендаций по дозировке препарата подобрана концентрация действующего вещества. В качестве вспомогательного компонента была выбрана лактоза. Изучены физические и технологические характеристики модельного образца гранул с GSH и лактозой в качестве наполнителя. Разработана и отвалидирована методика количественного определения GSHв гранулах с использованием предколоночной дериватизации орто-фталевым альдегидом методом ВЭЖХ.

Заключение

Заключение. Разработанная гранулированная лекарственная форма по анализируемым показателям соответствует требованиям, приведенным в ОФС «Гранулы». При помощи валидационной оценки установлено, что разработанная методика количественного определения GSH в гранулах является правильной, прецизионной и специфичной.

Biologically active sulfur-containing compounds (BASC) exhibit pronounced antioxidant properties. Glutathione reduced (GSH) occupies a particular position among these compounds. It represents a key link in the 3 antioxidant systems of the body from the existing four. Based on the foregoing, a GSH-based dosage form with antioxidant properties was proposed. The aim of this study is to work out a model granulated dosage form based on GSH and methods of its analysis by means of pre-column derivatization with ortho-phthalic aldehyde.

Materials and methods

Materials and methods. GSH and granulated dosage form based on GSH obtained by wet granulation were used as the object of the study. Quantitative evaluation of GSH content in the obtained granules was carried out using pre-column derivatization by the method of reversed-phase high-performance chromatography (RP HPLC). Ortho-phthalic aldehyde was used as a derivatizing agent. A diode-array detector was used to detect the resulting derivative. Ortho-phthalic aldehyde was used as a derivatizing agent. A diode-matrix detector was used to find out the resulting derivative.

Results

Results. In the course of the work, a model dosage form was created – granules based on GSH. By reference to the recommendations on the dosage of the drug, the concentration of the active substance was selected. Lactose was chosen as an auxiliary component. Physical and technological characteristics of a model sample of granules with GSH and lactose as a filler were studied. A method of quantitative determination of GSH in granules using pre-column derivatization with ortho-phthalic aldehyde was developed and validated by HPLC. The method of quantitative determination of GSH in granules with the use of pre-column derivatization by ortho-phthalic aldehyde by HPLC was developed and validated.

Conclusion

Conclusion. The developed granulated dosage form meets the requirements given in the pharmacopoeial item “Granules” according to the analyzed indicators. Using the validation evaluation it was established, that the developed methods for the quantitative determination of GSH in granules is correct, precise and specific.

глутатион восстановленныйорто-фталевый альдегидгранулыобращённо-фазная высокоэффективная жидкостная хроматографиядериватизациявалидацияreduced glutathioneortho-phthalic aldehydegranulesreverse phase high performance liquid chromatographyderivatizationvalidationReferencesWinterbourn C.C. Superoxide as an intracellular radical sink // Free Radic. Biol. Med. – 1993. – Vol. 14, № 1. – P. 85–90.Winterbourn CC. Superoxide as an intracellular radical sink. Free Radic. Free Radic Biol Med. 1993 Jan;14(1):85–90.High hepatic glutathione stores alleviate Fasinduced apoptosis in mice / S. Cazanave, A. Berson, D. Haouzi [et al.] // J Hepatol. – 2007. – Vol. 46, № 5. – P. 858–868.Cazanave S, Berson A, Haouzi D, et al. High hepatic glutathione stores alleviate Fas-induced apoptosis in mice. J Hepatol. 2007 May;46(5):858–68.Go Y.M., Jones D.P. Redox compartmentalization in eukaryotic cells / //Biochim Biophys Acta. – 2008. – Vol. 1780, № 11. – P. 1273–1290. DOI: 10.1016/j.bbagen.2008.01.011.Go YM, Jones DP. Redox compartmentalization in eukaryotic cells. Biochim Biophys Acta. 2008 Nov;1780(11):1273–90. DOI: 10.1016/j.bbagen.2008.01.011.Glutathione binding to the Bcl-2 homology-3 domain groove: a molecular basis for Bcl-2 antioxidant function at mitochondria / A.K. Zimmermann, F.A. Loucks, E.K. Schroeder [et al.] // J. Biol. Chem. – 2007. – Vol. 282, № 40. – P. 29296–29304. DOI: 10.1074/jbc.M702853200.Zimmermann AK1, Loucks FA, Schroeder EK, Bouchard RJ, et al. Glutathione binding to the Bcl-2 homology-3 domain groove: a molecular basis for Bcl-2 antioxidant function at mitochondria. J Biol Chem. 2007 Oct 5;282(40):29296–304. DOI: 10.1074/jbc.M702853200.Arnér E.S., Holmgren A. Physiological functions of thioredoxin and thioredoxin reductase // Eur J Biochem. – 2000. – Vol. 267, № 20. – P. 6102–6109. https://doi.org/10.1046/j.1432-1327.2000.01701.xArnér ES, Holmgren A. Physiological functions of thioredoxin and thioredoxin reductase. Eur J Biochem. 2000 Oct;267(20):6102–9. https://doi.org/10.1046/j.1432-1327.2000.01701.x.Iles K.E., Liu R.M. Mechanisms of glutamate cysteine ligase (GCL) induction by 4-hydroxynonenal // Free Radic. Biol Med. – 2004. – Vol. 38, № 5. – P. 547– 556. DOI: 10.1016/j.freeradbiomed.2004.11.012.Iles KE, Liu RM. Mechanisms of glutamate cysteine ligase (GCL) induction by 4-hydroxynonenal. Free Radic Biol Med. 2005 Mar 1;38(5):547-56. DOI: 10.1016/j.freeradbiomed.2004.11.012.Corbucci G.G. The role of reduced glutathione during the course of acute haemolysis in glucose-6-phosphate dehydrogenase deficient patients: clinical and pharmacodynamic aspects // Int J Clin Pharmacol Res. – 1990. – Vol. 10, №5. – P. 305–310.Corbucci G.G. The role of reduced glutathione during the course of acute haemolysis in glucose-6-phosphate dehydrogenase deficient patients: clinical and pharmacodynamic aspects. Int J Clin Pharmacol Res. 1990;10(5):305–10.Голиков С.Н., Саноцкий И.В., Тиунов Л.А. Общие механизмы токсического действия. – Л.: Медицина, 1986. – 280 с.Golikov SN, Sanockij IV, Tiunov LA. Obshchie mekhanizmy toksicheskogo dejstviya [General mechanisms of toxic action]. L:Medicina.1986. 280p. Russian.Еропкин М.Ю., Еропкина Е.М. Культуры клеток как модельная система исследования токсичности и скрининга цитопротекторных препаратов. – СПб.: МОРСАР АВ, 2003. – 239 с.Eropkin MYu, Eropkina EM. Kultury kletok kak modelnaya sistema issledovaniya toksichnosti i skrininga citoprotektornyh preparatov [Cultures of cells as a model system for the study of toxicity and screening of cytoprotective drugs]. SPb:MORSAR AB. 2003. 239p. Russian.Тиунов Л.А. Механизмы естественной детоксикации и антиоксидантной защиты // Вестник РАМН. – 1995. – №3. – С. 9–13.Tiunov LA. Mekhanizmy estestvennoj detoksikacii I antioksidantnoj zashchity [Mechanisms of natural detoxification and antioxidant protection]. Bulletin RAMS. 1995;3:9–13. Russian.Тиунов Л.А. Иванова В.А. Роль глутатиона в процессах детоксикации // Вестник АМН СССР. – 1988. – №1. – С. 62–69.Tiunov LA, Ivanova VA. Rol glutationa v processah detoksikacii [The role of glutathione in detoxification processes]. Bulletin AMS USSR. 1988;1:62–9. Russian.Harman D. Free-radical theory of aging: inversing the functional life span // Ann NY Acad Sci. – 2006. – Vol. 1067. – P. 10–21. DOI: 10.1196/annals.1354.003.Harman D. Free-radical theory of aging: inversing the functional life span. Ann N Y Acad Sci. 2006 May;1067:10–21. DOI: 10.1196/annals.1354.003.Lőrincz T., Szarka A. The determination of hepatic glutathione at tissue and subcellular level // J Pharmacol Toxicol Methods. – 2017. – Vol. 88, pt. 1. – P. 32–39. DOI: 10.1016/j.vascn.2017.05.004.Lőrincz T, Szarka A. The determination of hepatic glutathione at tissue and subcellular level. J Pharmacol Toxicol Methods. 2017 Nov;88(Pt 1):32–39. DOI: 10.1016/j.vascn.2017.05.004.Kanekal S., Kehrer J.P. Metabolism of cyclophosphamide by lipoxygenases // Drug Metab Dispos. – 1994. – Vol. 22, №1. – P. 74–78.Kanekal S, Kehrer JP. Metabolism of cyclophosphamide by lipoxygenases. Drug Metab Dispos. 1994 Jan-Feb;22(1):74–8.Traverso N., Ricciarelli R., Marengo B, et al. Role of glutathione in cancer progression and chemoresistance // Oxidative Medicine and Cellular Longevity. – 2013. – Vol. 2013. – Article ID 972913. https://doi.org/10.1155/2013/972913.Traverso N, Ricciarelli R, Marengo B, et al. Role of glutathione in cancer progression and chemoresistance // Oxidative Medicine and Cellular Longevity. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2013;2013. Article ID 972913. https://doi.org/10.1155/2013/972913.Поляков Н.А., Дубинская В.А., Астраханова М.М., Быков В.А. Гидратация и термодинамические характеристики образцов альфалактозы, полученные с использованием новых технологий // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. – 2011. – №8. – С. 7–11.Polyakov NA, Astrahanova MM, Dubinskaya VA, Bykov VA. Gidrataciya i termodinamicheskie harakteristiki obrazcov alfa laktozy poluchennye s ispolzovaniem novyh tekhnologij [Hydration and thermodynamic characteristics α-lactose, received on new technologies]. Problems of Biological, Medical and Pharmaceutical Chemistry. 2011;8:7–11. Russian.Lenton K.J., Therriault H., Wagner J.R. Analysis of glutathione and glutathione disulfide in whole cells and mitochondria by postcolumn derivatization high-performance liquid chromatography with ortho-phthalaldehyde // Anal Biochem. – 1999. – Vol. 274, № 1. – P. 125–130. DOI: 10.1006/abio.1999.4258.Lenton KJ, Therriault H, Wagner JR. Analysis of glutathione and glutathione disulfide in whole cells and mitochondria by postcolumn derivatization high-performance liquid chromatography with ortho-phthalaldehyde. Anal Biochem. 1999 Oct 1;274(1):125–30. DOI: 10.1006/abio.1999.4258.Общая фармакопейная статья ОФС.1.1.0012.15 «Валидация аналитических методик». – ГФ XIV. – М., 2018.Obshchaya farmakopejnaya statya OFS 1-1-0012-15 validaciya analiticheskih metodik [Pharmacopoeial item OFS.1.1.0012.15 “Validation of analytical methods”]. State Pharmacopoeia of Russian Federation XIV-th edition. Moscow;2018. Russian.Руководство по валидации методик анализа лекарственных средств. Методические рекомендации. – М.: Спорт и Культура – 2000, 2007. – С. 6–92.Rukovodstvo po validacii metodik analiza lekarstvennyh sredstv. Metodicheskie rekomendacii [Guidance on the validation of drug analysis techniques]. Moscow,2007:6–92. Russian.Общая фармакопейная статья ОФС.1.1.0013.15 «Статистическая обработка результатов химического эксперимента». – ГФ XIV. – М., 2018.Obshchaya farmakopejnaya statya OFS 1-1-0013-15 “Statisticheskaya obrabotka rezultatov himicheskogo ehksperimenta” [Pharmacopoeial item OFS.1.1.0013.15 “Statistical processing of the results of a chemical experiment”]. State Pharmacopoeia of Russian Federation XIV-th edition. Moscow; 2018. Russian.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.