pmedpharmФармация и фармакологияPharmacy & Pharmacology2307-92662413-2241Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute - branch of Volgograd State Medical Univer10.19163/2307-9266-2021-9-2-104-113pmedpharm-828Research ArticleФАРМАКОГНОЗИЯ, БОТАНИКАPHARMACOGNOSY, BOTANYАНТИМИКРОБНАЯ АКТИВНОСТЬ ВОДНО-СПИРТОВЫХ ИЗВЛЕЧЕНИЙ ЛИСТЬЕВ И ПОЧЕК ДУБА ЧЕРЕШЧАТОГО (QUERCUS ROBUR L.)ANTIMICROBIAL ACTIVITY OF WATER-ETHANOLIC EXTRACTIONS FROM QUERCUS ROBUR L. LEAVES AND BUDShttps://orcid.org/0000-0002-1332-953XРябовН. А.RyabovN. A.

аспирант кафедры фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии

postgraduate student of the Department of Pharmacognosy with Botany and the basics of Phytotherapy

ryabov.nikolay.2014@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8399-9328РыжовМ. В.RyzhovV. M.

кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии

Candidate of Sciences (Pharmacy), Associate Professor of the Department of Pharmacognosy with Botany and the basics of Phytotherapy

lavr_rvm@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-7513-9352КуркинВ. А.KurkinV. A.

доктор фармацевтических наук, профессор, заведующий кафедрой фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии

Doctor of Sciences (Pharmacy), Professor, Head of the Department of Pharmacognosy with Botany and the basics of Phytotherapy

kurkinvladimir@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9358-4436КолпаковаС. Д.KolpakovaS. D.

доктор медицинских наук, профессор кафедры общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии

Doctor of Sciences (Medicine), Professor of the Department of General and Clinical Microbiology, Immunology and Allergology

Sdkolpakova@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-3960-830XЖестковА. В.ZhestkovA. V.

доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии

Doctor of Sciences (Medicine), Head of the Department of General and Clinical Microbiology, Immunology and Allergology

avzhestkov2015@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5905-1895ЛяминА. В.LyaminA. V.

кандидат медицинских наук, доцент кафедры общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии

Candidate of Sciences (Medicine), Associate Professor of the Department of General and Clinical Microbiology, Immunology and Allergology

avlyamin@rambler.ruФедеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации 443099, Россия, г. Самара, ул. Чапаевская, 89РоссияSamara State Medical University 89, Chapaevskaya Str., Samara, Russia, 443099Russian Federation20212007202192104113Copyright © Рябов Н.А., Рыжов М.В., Куркин В.А., Колпакова С.Д., Жестков А.В., Лямин А.В., 20212021Рябов Н.А., Рыжов М.В., Куркин В.А., Колпакова С.Д., Жестков А.В., Лямин А.В.Ryabov N.A., Ryzhov V.M., Kurkin V.A., Kolpakova S.D., Zhestkov A.V., Lyamin A.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmpharm.ru/jour/article/view/828

Проблема поиска новых противомикробных препаратов на основе лекарственного растительного сырья в современной фармацевтической практике является по-прежнему актуальной. Интерес представляют растительные объекты, обладающие антимикробным действием благодаря содержанию в них комплекса биологически активных веществ. Дуб черешчатый – Quercus robur L. является перспективным растительным объектом, лекарственное растительное сырье которого может быть использовано при разработке новых антимикробных препаратов.

Цель

Цель. Проведение скрининга антимикробной активности водно-спиртовых извлечений листьев и почек дуба черешчатого.

Материалы и методы

Материалы и методы. Определение минимальной ингибирующей концентрации проводилось методом двойных серийных разведений в питательном бульоне Мюллера-Хинтона (Bio-Rad, США). В качестве тестовых культур были использованы штаммы микроорганизмов Американской коллекции типовых культур (АТСС): Staphylococcus aureus (АТСС 29213), Escherichia coli (АТСС 25922), Pseudomonas aeruginosa (АТСС 27853), а также Candida albicans (клинический штамм). Инкубацию проводили при температуре 35°С в течение 24 часов. Параллельно проводился опыт для постановки «отрицательного» контроля. Оценку результатов проводили визуально по наличию/отсутствию роста микроорганизмов в пробирках с соответствующими разведениями исследуемых образцов.

Результаты

Результаты. В ходе проведенного исследования установлено, что водно-спиртовые извлечения листьев дуба черешчатого оказывают наибольший антимикробный эффект в отношении штаммов Staphylococcus aureus и Escherichia coli. Водно-спиртовые извлечения почек дуба черешчатого проявляют выраженную антимикробную активность в отношении штаммов Pseudomonas aeruginosa и Candida albicans.

Выявлено, что препарат настойка листьев дуба черешчатого в соотношении «сырье – экстрагент» (1:5) обладает выраженным антимикробным эффектом на штаммы Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, а при большей кратности разведения на штаммы Escherichia coli и Candida albicans. Препарат настойка почек дуба черешчатого в соотношении «сырье – экстрагент» (1:5) обладает выраженным антимикробным эффектом в отношении штаммов микроорганизмов Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Escherichia coli и Candida albicans при восьмикратном разведении. В отношении штаммов Pseudomonas aeruginosa антимикробная активность наблюдалась при 16 кратном разведении. Максимально выраженный антимикробный эффект был зафиксирован в отношении штамма Candida albicans при 32 кратном разведении.

В результате проведенного исследования можно сделать вывод о том, что для получения противомикробных препаратов – настойки листьев и почек дуба черешчатого, целесообразно использовать в качестве оптимального экстрагента спирт 70% в соотношении «сырье – экстрагент» (1:5). При данных параметрах экстракции отмечается наибольший антимикробный эффект в отношении изучаемых штаммов микроорганизмов. Также спирт 70% обладает лучшей проникающей способностью в глубокие слои эпидермиса по сравнению с более высокими концентрациями.

Заключение

Заключение. Полученные результаты скринингового анализа антимикробной активности будут использованы в качестве обоснования для внедрения антимикробных препаратов на основе листьев и почек дуба черешчатого в медицинскую и фармацевтическую практику.

The problem of finding new antimicrobial drugs based on medicinal plant raw materials in modern pharmaceutical practice, is still relevant. There are interesting plant objects that have an antimicrobial action due to the content of a complex of biologically active substances in them. Quercus robur L. is a promising plant object, medicinal plant raw materials of which can be used for the development of new antimicrobial drugs.

The aim of the study is screening of the antimicrobial activity of water-ethanolic extractions from Quercus robur L leaves and buds.

Materials and methods

Materials and methods. The determination of the minimum inhibitory concentration was carried out by the method of double serial dilutions in Mueller-Hinton nutrient broth (Bio-Rad, USA). As test cultures, strains of microorganisms of the American Type Culture Collection (ATCC) were used: Staphylococcus aureus (ATCC 29213), Escherichia coli (ATCC 25922), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), as well as Candida albicans (a clinical strain). The incubation was carried out at the temperature of 35°C for 24 hours. Simultaneously, an experiment was carried out to establish a "negative" control. The results were assessed visually by the presence / absence of the growth of microorganisms in test tubes with the corresponding dilutions of the test samples.

Results

Results. In the course of the study, it was found out that water-ethanolic extractions of Quercus robur L. leaves have the greatest antimicrobial effect against strains of Staphylococcus aureus and Escherichia coli. The water-ethanolic extractions of Quercus robur L. buds exhibit a pronounced antimicrobial activity against Pseudomonas aeruginosa and Candida albicans strains.

It was revealed that the preparation of Quercus robur L. leaves tincture in the raw material:extractant ratio of 1:5 has a pronounced antimicrobial effect on the strains of Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, and with a higher multiplicity of dilution - on the strains of Escherichia coli and Candida albicans. The drug tincture of Quercus robur L. buds in the raw material:extractant ratio of 1:5 has a pronounced antimicrobial effect on the strains of microorganisms P. aeruginosa, S. aureus, E. coli and C. albicans in an eight-fold dilution. With respect to P. aeruginosa strains, antimicrobial activity was observed in 16-fold dilutions. The most pronounced antimicrobial effect was recorded against the C. albicans strain in a 32-fold dilution.

As a result of the study, it can be concluded that to obtain the antimicrobial drugs - tincture of Quercus robur L. leaves and buds - is advisable to use the optimal extractant – 70% alcohol in a raw material:extractant ratio of 1:5. With these parameters of extraction, the greatest antimicrobial effect is observed in relation to the studied strains of the microorganisms. 70% alcohol has also a better penetrating ability into the deep layers of the epidermis in comparison with higher concentrations.

Conclusion

Conclusion. The results of the screening analysis of the antimicrobial activity will be used as a justification for the introduction of antimicrobial drugs based on the leaves and buds of the Quercus robur L. in a medical and pharmaceutical practice.

Дуб черешчатыйQuercus robur L.листьяпочкиводно-спиртовые извлечениянастойкаминимальная ингибирующая концентрацияантимикробная активностьEnglish oakQuercus robur L.leavesbudswater-ethanolic extractionstinctureminimum inhibitory concentrationantimicrobial activityДанное исследование не имело какой-либо поддержки от сторонних организаций.ReferencesDasgupta А., Krasowski M.D. Chapter 10 - Therapeutic drug monitoring of antimicrobial, antifungal and antiviral agents, Therapeutic Drug Monitoring Data (Fourth Edition), Academic Press. - 2020. – P.159-197. DOI: 10.1016/B978-0-12-815849-4.00010-4Dasgupta А, Krasowski MD. Chapter 10 - Therapeutic drug monitoring of antimicrobial, antifungal and antiviral agents, Therapeutic Drug Monitoring Data (Fourth Edition), Academic Press. 2020;159-197. DOI: 10.1016/B978-0-12-815849-4.00010-4Andrade H.B., Shinotsuka C.R., da Silva I.R.F., Donini C.S., Yeh Li H., de Carvalho F.B., Americano do Brasil P.E.A., Bozza F.A., Miguel Japiassu A. Highly active antiretroviral therapy for critically ill HIV patients: A systematic review and meta-analysis // PLoS One. – 2017. – Vol.12, No.10. - e0186968. DOI: 10.1371/journal.pone.0186968.Andrade HB, Shinotsuka CR, da Silva IRF, Donini CS, Yeh Li H, de Carvalho FB, Americano do Brasil PEA, Bozza FA, Miguel Japiassu A. Highly active antiretroviral therapy for critically ill HIV patients: A systematic review and meta-analysis. PLoS One. 2017 Oct 24;12(10):e0186968. DOI: 10.1371/journal.pone.0186968.Grozdova N.B., Nekrasov V.I., Globa-Mikhailenko D.A. Trees, shrubs and vines. M .: Lesn. industry, 1986. - P. 176-178.Grozdova N.B., Nekrasov V.I., Globa-Mikhailenko D.A. Trees, shrubs and vines. M .: Lesn. industry. 1986: 176-178.Maevsky P.F. Flora of the middle zone of the European part of Russia. 11th ed. M .: Partnership of scientific publications KMK, 2014. p. 200-201.Maevsky P.F. Flora of the middle zone of the European part of Russia. 11th ed. M .: Partnership of scientific publications KMK. 2014:200-201British Pharmacopoeia 2009. British Pharmacopoeia Herbal Drugs and Herbal Drug Preparations. Oak Bark. 2009; Vol. III. 7203 p.British Pharmacopoeia 2009. British Pharmacopoeia Herbal Drugs and Herbal Drug Preparations. Oak Bark. 2009; Vol. III. 7203 p.European Pharmacopoeia - 8th Edition. «01/2008:1887 corrected 6.0». 2013. [Электронный ресурс]. Режим доступа: http://pharmeuropa.edqm.eu (Дата обращения 12 апреля 2021).European Pharmacopoeia - 8th. «01/2008:1887 corrected 6.0». 2013. Available from: http://pharmeuropa.edqm.euГосударственная фармакопея Российской Федерации / МЗ РФ. XIV изд. Т. I-IV. М., 2018. [Электронный ресурс]. Режим доступа: http:// http://femb.ru/femb/pharmacopea.php (Дата обращения 16 апреля .2021).State Pharmacopoeia of Russian Federation. XIV ed; Vol. I-IV. М. 2018. Available from: http:// http://femb.ru/femb/pharmacopea.php.Fatehi S., Mohammadi Sichani M., Tavakoli M. Evaluation of antimicrobial and Anti-quorum sensing activity of mazouj and ghalghaf galls extracts of oak against Pseudomonas aeruginosa // Qom Univ Med Sci J. – 2018. – Vol.12, No.10. – P.36-45. DOI:10.29252/qums.12.10.36Fatehi S, Mohammadi Sichani M, Tavakoli M. Evaluation of antimicrobial and Anti-quorum sensing activity of mazouj and ghalghaf galls extracts of oak against Pseudomonas aeruginosa. Qom Univ Med Sci J. 2018;12(10):36-45. DOI:10.29252/qums.12.10.36Pailhoriès H., Munir M.T., Aviat F., Federighi M., Belloncle C., Eveillard M. Oak in Hospitals, the Worst Enemy of Staphylococcus aureus? // Infection Control & Hospital Epidemiology. – 2017. – Vol.38, No.3. – P.382–384. DOI:10.1017/ice.2016.304Pailhoriès H, Munir MT, Aviat F, Federighi M, Belloncle C, Eveillard M. Oak in Hospitals, the Worst Enemy of Staphylococcus aureus? Infection Control & Hospital Epidemiology. 2017;38(3):382–384. DOI:10.1017/ice.2016.304Smailagić A., Ristivojević P., Dimkić I., Pavlović T., Dabić Zagorac D., Veljović S., Fotirić Akšić M., Meland M., Natić M. Radical Scavenging and Antimicrobial Properties of Polyphenol Rich Waste Wood Extracts // Foods. – 2020. – Vol.9, No.3. – P.319. DOI: 10.3390/foods9030319.Smailagić A, Ristivojević P, Dimkić I, Pavlović T, Dabić Zagorac D, Veljović S, Fotirić Akšić M, Meland M, Natić M. Radical Scavenging and Antimicrobial Properties of Polyphenol Rich Waste Wood Extracts. Foods. 2020 Mar 10;9(3):319. DOI: 10.3390/foods9030319.Sarwar R, Farooq U, Naz S, Riaz N, Majid Bukhari S, Rauf A, Mabkhot Ya.N., Al-Showiman S.S. Isolation and Characterization of Two New Antimicrobial Acids from Quercus incana (Bluejack Oak) // Biomed Res Int. – 2018. – Vol.2018. - 3798105. DOI:10.1155/2018/3798105Sarwar R, Farooq U, Naz S, Riaz N, Majid Bukhari S, Rauf A, et al. Isolation and Characterization of Two New Antimicrobial Acids from Quercus incana (Bluejack Oak). Biomed Res Int. 2018;2018:3798105. DOI:10.1155/2018/3798105Smailagić A., Zagorac D.D., Veljović S., Sredojević M., Relić D., Fotirić M. A., Roglić G., Natić M. Release of wood extractable elements in experimental spirit model: Health risk assessment of the wood species generated in Balkan cooperage // Food Chemistry. – 2021. – Vol. 338. – 127804. DOI:10.1016/j.foodchem.2020.127804.Smailagić A., Zagorac D.D., Veljović S., Sredojević M., Relić D., Fotirić M. A., Roglić G., Natić M. Release of wood extractable elements in experimental spirit model: Health risk assessment of the wood species generated in Balkan cooperage. Food Chemistry. 2021; 338: 127804. DOI:10.1016/j.foodchem.2020.127804.Elansary O. H., Szopa A., Kubica P., Ekiert H., Mattar A. M., Al-Yafrasi M.A., El-Ansary D.O., Zin El-Abedin T.K., Yessoufou K. Polyphenol Profile and Pharmaceutical Potential of Quercus spp // Bark Extracts. Plants. – 2019. – Vol.8, No.11. - 486. DOI:10.3390/plants8110486Elansary O. H, Szopa A, Kubica P, Ekiert H, A. Mattar M, Al-Yafrasi MA, El-Ansary DO, Zin El-Abedin TK, Yessoufou K. Polyphenol Profile and Pharmaceutical Potential of Quercus spp. Bark Extracts. Plants. 2019; 8(11):486. DOI:10.3390/plants8110486Rao N. In vitro phytochemical screening, antioxidant & antimicrobial activity of the methanolic extract of Quercus infectoria L. – 2013. – Vol.5. – P.273-277.Rao N. In vitro phytochemical screening, antioxidant & antimicrobial activity of the methanolic extract of Quercus infectoria L. 2013;5:273-277.Dróżdż P., Pyrzyńska K. Assessment of polyphenol content and antioxidant activity of oak bark extracts // European Journal of Wood and Wood Products. – 2017. – Vol.76. – P.793-795. DOI:10.1007/s00107-017-1280-x.Dróżdż, Paulina and K. Pyrzyńska. Assessment of polyphenol content and antioxidant activity of oak bark extracts. European Journal of Wood and Wood Products. 2017; 76: 793-795. DOI:10.1007/s00107-017-1280-x.Sánchez-Burgosa J.A., Ramírez-Maresb M.V., Larrosac M.M., Gallegos-Infantea J.A., González-Laredoa R.F., Medina-Torresd L., Rocha-Guzmána N.E. Antioxidant, antimicrobial, antitopoisomerase and gastroprotective effect of herbal infusions from four Quercus species. Industrial Crops and Products. – 2013. – Vol.42. – P.57-62. DOI:10.1016/j.indcrop.2012.05.017Sánchez-Burgosa J.A., Ramírez-Maresb M.V., Larrosac M.M., Gallegos-Infantea J.A., González-Laredoa R.F., Medina-Torresd L., Rocha-Guzmána N.E. Antioxidant, antimicrobial, antitopoisomerase and gastroprotective effect of herbal infusions from four Quercus species. Industrial Crops and Products. 2013;42: 57-62. DOI:10.1016/j.indcrop.2012.05.017Буданцев, А.Л. Растительные ресурсы России. Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность. Том 2: Actinidiaceae-Malvaceae, Euphorbiaceae-Haloragaceae. / А.Л. Буданцев. - М.: Товарищество научных изданий КМК, 2009. - 774 c.Budantsev AL. Vegetables of Russia: Wild flowering plants, their component composition and biological activity. 2nd ed. Families Actinidiaceae-Malvaceae, Euphorbiaceae-Haloragaceae. M., Partnership of scientific publications KMK, 2009. 774 p. RussianGrotewold E. The Science of Flavonoids. 8th ed. New York: Springer. 2006. 274 p. DOI:10.1007/978-0-387-28822-2.Grotewold E. The Science of Flavonoids. 8th ed. New York: Springer. 2006:274 . DOI:10.1007/978-0-387-28822-2.Bedi M.K., Shenefelt P.D. Herbal Therapy in Dermatology // Archives of Dermatology. – 2002. – Vol.138, No.2. – P.237-238. DOI:10.1001/archderm.138.2.232.Bedi MK, Shenefelt PD. Herbal Therapy in Dermatology. Archives of Dermatology. 2002; 138(2): 237-238. DOI:10.1001/archderm.138.2.232.Cushnie T.P., Lamb A.J. Recent advances in understanding the antibacterial properties of flavonoids // Int. J. Antimimicrob. Agents. – 2011. – Vol.38. – P.99–107. DOI: 10.1016/j.ijantimicag.2011.02.014.Cushnie TP, Lamb AJ. Recent advances in understanding the antibacterial properties of flavonoids. Int. J. Antimimicrob. Agents. 2011;38: 99–107. DOI: 10.1016/j.ijantimicag.2011.02.014.Scalbert A., Haslam E. Polyphenols and chemical defence of the leaves of Quercus robur // Phytochemistry. – 1987. – Vol.26. – P.3191-3195. DOI:10.1016/S0031-9422(00)82468-1.Scalbert A, Haslam E. Polyphenols and chemical defence of the leaves of Quercus robur. Phytochemistry. 1987;26:3191-3195. DOI:10.1016/S0031-9422(00)82468-1.Benyagoub E., Nabbou N., Dine A. Antimicrobial Effect of Quercus robur L. Leaves Selective Extracts from the Mezi Mountain of Djenane Bourezg (West of Algeria) // Current Bioactive Compounds. – 2020. – Vol.16, No.8. – P.1181-1190. DOI:10.2174/1573407216666191226141609.Benyagoub E, Nabbou N, Dine A. Antimicrobial Effect of Quercus robur L. Leaves Selective Extracts from the Mezi Mountain of Djenane Bourezg (West of Algeria). Current Bioactive Compounds. 2020;16(8):1181-1190. DOI: 10.2174/1573407216666191226141609.Benyagoub E., Nabbou N., Boukhalkhel S., Dehini I. The In vitro Evaluation of the Antimicrobial Activity of Quercus robur L. Methanolic and Aqueous Leaves’ Extracts, from the Algerian High Plateaus Against some Uropathogenic Microbial Strains // Phytopathology. – 2019. – Vol.12. DOI: 10.29252/qums.12.10.36.Benyagoub E, Nabbou N, Boukhalkhel S, Dehini I. The In vitro Evaluation of the Antimicrobial Activity of Quercus robur L. Methanolic and Aqueous Leaves’ Extracts, from the Algerian High Plateaus Against some Uropathogenic Microbial Strains. Phytopathology. 2019:12. DOI: 10.29252/qums.12.10.36.Sánchez-Burgosa J.A., Ramírez-Maresb M.V., Larrosac M.M., Gallegos-Infantea J.A., González-Laredoa R.F., Medina-Torresd L., Rocha-Guzmána N.E. Antioxidant, antimicrobial, antitopoisomerase and gastroprotective effect of herbal infusions from four Quercus species. Industrial Crops and Products. – 2013. – Vol.42. – P.57-62. DOI:10.1016/j.indcrop.2012.05.017Sanchez-Burgos J, Ramírez-Mares M, Larrosa M, Gallegos-Infante J, González-Laredo R, Medina-Torres L, et al. Antioxidant, antimicrobial, antitopoisomerase and gastroprotective effect of herbal infusions from four Quercus species. Industrial Crops and Products. 2013;42:57-62. DOI:10.1016/j.indcrop.2012.05.017.Nassima B, Behidj-Benyounes N, Ksouri R. Antimicrobial and antibiofilm activities of phenolic compounds extracted from Populus nigra and Populus alba buds (Algeria) // Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences. – 2019. – Vol. 55. - e18114. DOI:10.1590/s2175-97902019000218114Nassima B, Behidj-Benyounes N, Ksouri R. Antimicrobial and antibiofilm activities of phenolic compounds extracted from Populus nigra and Populus alba buds (Algeria). Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences. 2019; 55: e18114. DOI:10.1590/s2175-97902019000218114Isidorov V.A., Bagan R., Szczepaniak L., Swiecicka I. Chemical profile and antimicrobial activity of extractable compounds of Betula litwinowii (Betulaceae) buds // Open Chemistry. – 2015. – Vol.13, No.1. – P.123-127. DOI: 10.1515/chem-2015-0019Isidorov VA, Bagan R, Szczepaniak L, Swiecicka I. Chemical profile and antimicrobial activity of extractable compounds of Betula litwinowii (Betulaceae) buds. Open Chemistry. 2015;13(1):123-127. DOI: 10.1515/chem-2015-0019The definition of the sensitivity of microorganisms to antibacterial drugs. Guidelines. MUK 4.2.1890-04. Clinical Microbiology and Antimicrobial Chemotherapy. – 2004. – Vol.6, No.4. – P.306-359.The definition of the sensitivity of microorganisms to antibacterial drugs. Guidelines. MUK 4.2.1890-04. Clinical Microbiology and Antimicrobial Chemotherapy. 2004;6(4):306-359.Козлова И. В., Лекарева Л. И., Быкова А. П. Кандидоз желудочно-кишечного тракта // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - 2016. – Т.3. - С. 40-46.Kozlova I.V., Lekareva L.I., Bykova A.P., Myalina Yu.N., Ostrovskaja L.Yu. Candidiasis gastrointestinal tract. Experimental and Clinical Gastroenterology. 2016;(3):40-46. RussianGolus J., Sawicki R., Widelski J., Ginalska G. The agar microdilution method – a new method for antimicrobial susceptibility testing for essential oils and plant extracts // J Appl Microbiol. – 2016. – Vol.121. – P.1291-1299. DOI: 10.1111/jam.13253Golus J, Sawicki R, Widelski J, Ginalska G. The agar microdilution method – a new method for antimicrobial susceptibility testing for essential oils and plant extracts. J. Appl. Microbiol. 2016;121:1291-1299. DOI: 10.1111/jam.13253

The authors declare that there are no conflicts of interest present.