Результаты исследования противовирусной активности субстанции АСД при экспериментальном заражении мышей вирусами гриппа

Цель. Оценка противовирусной эффективности препарата АСД на модели летальной гриппозной пневмонии у мышей в отношении вирусов гриппа А подтипов Н3N2, H5N2 и H5N8.

Материалы и методы. Мышей линии Balb/c инфицировали вирусами гриппа. Оценивали снижение смертности и улучшение динамики веса зараженных животных (по 15 особей в группе), также определяли вирусную нагрузку в легочной ткани на 3 сут после заражения (по 6 особей в группе). Препаратом сравнения служил осельтамивир, животным из группы отрицательного контроля вводили плацебо. Препараты вводили по лечебно-профилактической или лечебной схеме.

Результаты. При инфицировании вирусом H5N8 максимальная потеря веса (группа плацебо) составила 16,8% на 12 сут (лечебно-профилактическая схема) и 14,8% на 9 сут (лечебная схема). АСД ухудшал динамику снижения веса, до 21% на 12 сут (лечебно-профилактическая схема) и до 28,4% на 9 сут (лечебная схема). При инфицировании вирусом H5N2 максимальная потеря веса составила 34,6% на 8 сут (лечебно-профилактическая схема) и 31,2% на 7 сут (лечебная схема). Препарат АСД уменьшал динамику снижения веса: до 29,9% на 8 сут (лечебно-профилактическая схема) и до 26,3% на 7 сут (лечебная схема). При инфицировании вирусом H3N2 максимальная потеря веса составила 38,4% на 11 сут (лечебно-профилактическая схема) и на 33,9% в на 9 сут (лечебная схема). Препарат АСД улучшал динамику снижения веса до 18,5% на 11 сут (лечебно-профилактическая схема), но при лечебной схеме ухудшал динамику до 34,1% на 9 сут. Обнаружили снижение выживаемости мышей, зараженных вирусом H5N8, при использовании АСД (лечебная схема). У мышей, получавших АСД, и зараженных вирусом H3N2 (лечебно-профилактическая схема) или H5N2 (лечебная схема) отметили тенденцию к протективному действию препарата. Влияния препарата АСД на уровень вирусной нагрузки не отметили.

Заключение. Препарат АСД проявляет противовирусные свойства при пероральном введении по лечебно-профилактической схеме в отношении вируса гриппа А (подтипы H3N2 и H5N2).

1. Пшеничная Н.Ю., Лизинфельд И.А., Шипилов М.В. Вакцинация от гриппа как компонент эпидемиологического контроля за инфекциями, связанными с оказанием медицинской помощи // Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. – 2025. – Т. 14, № 2. – С. 73–81. DOI: 10.33029/2305-3496-2025-14-2-73-81

2. Костинов М.П., Тюкавкина С.Ю., Харсеева Г.Г., Настаева Н.Ю. Эффективность вакцинации против гриппа в условиях пандемии COVID-19 (материал для подготовки лекции) // Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. – 2023. – Т. 12, № 4. – С. 90–99. DOI: 10.33029/2305-3496-2023-12-4-90-99

3. Demicheli V., Jeggarson T., Ferroni E., Rivetti A., Di Pietrantonj C. Vaccines for preventing influenza in healthy adults // Cochrane Database Syst Rev. – 2018. – Vol. 2018, No. 2. – P. CD001269. DOI: 10.1002/14651858.CD001269.pub6

4. Treanor J.J. CLINICAL PRACTICE. Influenza Vaccination // N Engl J Med. – 2016. – Vol. 375, No. 13. – P. 1261–1268. DOI: 10.1056/NEJMcp1512870

5. Wiselka M. Influenza: diagnosis, management, and prophylaxis // BMJ. – 1994. – Vol. 308, № 6940. – P. 1341–1345. DOI: 10.1136/bmj.308.6940.1341

6. Lafond K.E,. Porter R.M., Whaley M.J., Suizan Z., Ran Z., Aleem M.A., Thapa B., Sar B., Proschle V.S., Peng Z., Feng L., Coulibaly D., Nkwembe E., Olmedo A., Ampofo W., Saha S., Chadha M., Mangiri A., Setiawaty V., Ali S.S., Chaves S.S., Otorbaeva D., Keosavanh O., Saleh M., Ho A., Alexander B., Oumzil H., Baral K.P., Huang Q.S., Adebayo A.A., Al-Abaidani I., von Horoch M., Cohen C., Tempia S., Mmbaga V., Chittaganpitch M., Casal M., Dang D.A., Couto P., Nair H., Bresee J.S., Olsen S.J., Azziz-Baumgartner E., Nuorti J.P., Widdowson M.A.; Global Respiratory Hospitalizations–Influenza Proportion Positive (GRIPP) Working Group. Global burden of influenza-associated lower respiratory tract infections and hospitalizations among adults: A systematic review and meta-analysis // PLoS Med. – 2021. – Vol. 18, No. 3. – P. e1003550. DOI: 10.1371/journal.pmed.1003550

7. Ruf B.R., Knuf M. The burden of seasonal and pandemic influenza in infants and children // Eur J Pediatr. – 2014. – Vol. 173, No 3. – P. 265–276. DOI: 10.1007/s00431-013-2023-6

8. Fraaij P.L.A., Heikkinen T. Seasonal influenza: the burden of disease in children // Vaccine. – 2011. – Vol. 29, No. 43. – P. 7524–7528. DOI: 10.1016/j.vaccine.2011.08.010

9. Lafond K.E., Nair H., Rasooly M.H., Valente F., Booy R., Rahman M., Kitsutani P., Yu H., Guzman G., Coulibaly D., Armero J., Jima D., Howie S.R., Ampofo W., Mena R., Chadha M., Sampurno O.D., Emukule G.O., Nurmatov Z., Corwin A., Heraud J.M., Noyola D.E., Cojocaru R., Nymadawa P., Barakat A., Adedeji A., von Horoch M., Olveda R., Nyatanyi T., Venter M., Mmbaga V., Chittaganpitch M., Nguyen T.H., Theo A., Whaley M., Azziz-Baumgartner E., Bresee J., Campbell H., Widdowson M.A.; Global Respiratory Hospitalizations–Influenza Proportion Positive (GRIPP) Working Group. Global role and burden of influenza in pediatric respiratory hospitalizations, 1982–2012: a systematic analysis // PLoS Med. – 2016. – Vol. 13, No. 3. – P. e1001977. DOI: 10.1371/journal.pmed.1001977. Erratum in: PLoS Med. – 2016. – Vol. 13, No. 6. – P. e1002060. DOI: 10.1371/journal.pmed.1002060

10. Nair H., Brooks W.A., Katz M., Roca A., Berkley J.A., Madhi S.A., Simmerman J.M., Gordon A., Sato M., Howie S., Krishnan A., Ope M., Lindblade K.A., Carosone-Link P., Lucero M., Ochieng W., Kamimoto L., Dueger E., Bhat N., Vong S., Theodoratou E., Chittaganpitch M., Chimah O., Balmaseda A., Buchy P., Harris E., Evans V., Katayose M., Gaur B., O’Callaghan-Gordo C., Goswami D., Arvelo W., Venter M., Briese T., Tokarz R., Widdowson M.A., Mounts A.W., Breiman R.F., Feikin D.R., Klugman K.P., Olsen S.J., Gessner B.D., Wright P.F., Rudan I., Broor S., Simões E.A., Campbell H. Global burden of respiratory infections due to seasonal influenza in young children: a systematic review and meta-analysis // Lancet. – 2011. – Vol. 378, No. 9807. – P. 1917–1930. DOI: 10.1016/S0140-6736(11)61051-9

11. Gill P.J., Ashdown H.F., Wang K., Heneghan C., Roberts N.W., Harnden A., Mallett S. Identification of children at risk of influenza-related complications in primary and ambulatory care: a systematic review and meta-analysis // Lancet Respir Med. – 2015. – Vol. 3, No. 2. – P. 139–149. DOI: 10.1016/S2213-2600(14)70252-8 Erratum in: Lancet Respir Med. – 2015. – Vol. 3, No. 2. – P. e3. DOI: 10.1016/S2213-2600(14)70312-1

12. Prada G.I., Băjenaru O.L., Chelu G.C., Matei-Lincă C.M., Nuţă C.R., Moscu S.G. Protecting the elderly from influenza in the context of immune system senescence. Elderly aged 65 and over are vulnerable to influenza and its associated complications: Position paper by the Romanian Society of Gerontology and Geriatrics // J Med Life. – 2024. – Vol. 17, No. 7. – P. 746–754. DOI: 10.25122/jml-2024-0274

13. Gong E.Y. Antiviral methods and protocols. 2nd ed. Berlin/Heidelberg, Germany: Springer, 2013. – 452 p. DOI: 10.1007/978-1-62703-484-5

14. Donis R.O.; Influenza Cell Culture Working Group; Davis C.T., Foust A., Hossain M.J., Johnson A., Klimov A., Loughlin R., Xu X., Tsai T., Blayer S., Trusheim H., Colegate T., Fox J., Taylor B., Hussain A., Barr I., Baas C., Louwerens J., Geuns E., Lee M.S,. Venhuizen O., Neumeier E., Ziegler T. Performance characteristics of qualified cell lines for isolation and propagation of influenza viruses for vaccine manufacturing // Vaccine. – 2014. – Vol. 32, No. 48. – P. 6583–6590. DOI: 10.1016/j.vaccine.2014.06.045

15. Treanor J.J., Hayden F.G., Vrooman P.S., Barbarash R., Bettis R., Riff D., Singh S., Kinnersley N., Ward P., Mills R.G. Efficacy and safety of the oral neuraminidase inhibitor oseltamivir in treating acute influenza: a randomized controlled trial. US Oral Neuraminidase Study Group // JAMA. – 2000. – Vol. 283, No. 8. – P. 1016-1024. DOI: 10.1001/jama.283.8.1016

16. McClellan K., Perry C.M. Oseltamivir: a review of its use in influenza // Drugs. – 2001. – Vol. 61, No. 2. – P. 263–283. DOI: 10.2165/00003495-200161020-00011 Erratum in: Drugs. – 2001. – Vol. 61, No. 6. – P. 775.

17. Dobson J., Whitley R.J., Pocock S., Monto A.S. Oseltamivir treatment for influenza in adults: a meta-analysis of randomised controlled trials // Lancet. – 2015. – Vol. 385, No. 9979. – P. 1729–1737. DOI: 10.1016/S0140-6736(14)62449-1 Erratum in: Lancet. – 2015. – Vol. 385, No. 9979. – P. 1728. DOI: 10.1016/S0140-6736(15)60892-3 Erratum in: Lancet. – 2015. – Vol. 385, No. 9979. – P. 1728. DOI: 10.1016/S0140-6736(15)60893-5

18. Jefferson T., Jones M.A., Doshi P., Del Mar C.B., Hama R., Thompson M.J., Spencer E.A., Onakpoya I., Mahtani K.R., Nunan D., Howick J., Heneghan C.J. Neuraminidase inhibitors for preventing and treating influenza in adults and children // Cochrane Database Syst Rev. – 2014. – Vol. 2014, No. 4. – P. CD008965. DOI: 10.1002/14651858.CD008965.pub4

19. Reed L.J., Muench H. A simple method of estimating fifty percent endpoints // Am J Epidemiol. – 1938. – Vol. 27, No. 3. – P. 493–497. DOI: 10.1093/oxfordjournals.aje.a118408

20. Bland J.M., Altman D.G. Survival probabilities (the Kaplan-Meier method) // BMJ. – 1998. – Vol. 317, No. 7172. – P. 1572. DOI: 10.1136/bmj.317.7172.1572

21. Etikan I., Bukirova K., Yuvali M. Choosing statistical tests for survival analysis // Biometrics & Biostatistics International Journal. – 2018. – Vol. 7. – No. 5. – P. 477–481. DOI:10.15406/BBIJ.2018.07.00249

22. Shapiro S.S., Francia R.S. An approximate analysis of variance test for normality // Journal of the American Statistical Association. – 1972. – Vol. 67, No. 337. – P. 215–216. DOI: 10.1080/01621459.1972.10481232

23. Shapiro S.S., Wilk M.B. An analysis of variance test for normality (complete samples) // Biometrika. – 1965. – Vol. 52, No. 3/4. – P. 591–611. DOI: 10.2307/2333709

24. Mann H.B., Whitney D.R. On a Test of Whether one of Two Random Variables is Stochastically Larger than the Other // Ann. Math. Statist. – 1947. – Vol. 18, No. 1. – P. 50–60. DOI: 10.1214/aoms/1177730491

25. Смирнов В.С., Гаршинина А.В., Гусева В.М., Калинина Н.А., Штро А.А., Беляевская С.В., Аникин В.Б., Зарубаев В.В. Противовирусная активность комплекса глицирризиновая кислота-глутамил-триптофан при экспериментальной летальной гриппозной инфекции у белых мышей, вызванной озельтамивирустойчивым штаммом вируса // Вопросы вирусологии. – 2013. – Т. 58, № 5. – C. 19–26. EDN: RGQWPD

26. Зарубаев В.В., Васильева С.В., Есаулкова Я.Л., Гаршинина А.В., Вепринцева В.М., Галочкина А.В., Процак Е.С., Теселкин И.В., Морковник А.С., Диваева Л.Н., Лаврентьева И.Н. Протективная активность новых производных бензимидазола при экспериментальной гриппозной инфекции // Инфекция и иммунитет. – 2018. – Т. 8, № 2. – C. 195–200. DOI: 10.15789/2220-7619-2018-2-195-200

27. Kirk N.M., Liang Y., Ly H. Comparative Pathology of Animal Models for Influenza A Virus Infection // Pathogens. – 2023. – Vol. 13, No. 1. – P. 35. DOI: 10.3390/pathogens13010035

28. Bouvier N.M., Lowen A.C. Animal Models for Influenza Virus Pathogenesis and Transmission // Viruses. – 2010. – Vol. 2, No. 8. – P. 1530–1563. DOI: 10.3390/v20801530

29. Solomon D.A. Seasonal influenza vaccination // JAMA. – 2020. – Vol. 324, No 13. – P. 1362. DOI: 10.1001/jama.2020.14772

30. Маркова Т.П., Ярилина Л.Г. Современная противовирусная терапия гриппа и ОРВИ // РМЖ. Медицинское Обозрение. – 2015. – Т. 23, № 4. – С. 211–215. EDN: UBGUKH

31. Meseko C. Sanicas M., Asha K., Sulaiman L., Kumar B. Antiviral options and therapeutics against influenza: history, latest developments and future prospects // Front Cell Infect Microbiol. – 2023. – Vol. 13. – P. 1269344. DOI: 10.3389/fcimb.2023.1269344

32. Aoki F.Y., Allen U.D., Mubareka S., Papenburg J., Stiver H.G., Evans G.A. Use of antiviral drugs for seasonal influenza: Foundation document for practitioners-Update 2019 // J Assoc Med Microbiol Infect Dis Can. – Vol. 4, No. 2. – P. 60–82. DOI: 10.3138/jammi.2019.02.08

33. Amber R., Adnan M., Tariq A., Mussarat S. A review on antiviral activity of the Himalayan medicinal plants traditionally used to treat bronchitis and related symptoms // J Pharm Pharmacol. – 2016. – Vol. 69, No. 2. – P. 109–122. DOI: 10.1111/jphp.12669

34. Mahima, Rahal A., Deb R., Latheef S.K., Abdul Samad H., Tiwari R., Verma A.K., Kumar A., Dhama K. Immunomodulatory and therapeutic potentials of herbal, traditional/indigenous and ethnoveterinary medicines // Pak J Biol Sci. – 2012. – Vol. 15, No. 16. – P. 754–774. DOI: 10.3923/pjbs.2012.754.774

35. Ijomone O.M., Obi A.U. Kolaviron, isolated from Garcinia kola, inhibits acetylcholinesterase activities in the hippocampus and striatum of wistar rats // Ann Neurosci. – 2013. – Vol. 20, No. 2. – P. 42–46. DOI: 10.5214/ans.0972.7531.200203

36. Awogbindin I.O., Olaleye D.O., Farombi E.O. Kolaviron improves morbidity and suppresses mortality by mitigating oxido-inflammation in BALB/c mice infected with influenza virus // Viral Immunol. – 2015. – Vol. 28, No. 7. – P. 367–377. DOI: 10.1089/vim.2015.0013

37. Sulaiman L.K., Oladele O.A., Shittu I.A., Emikpe B.O., Oladokun A.T., Meseko C.A. In-ovo evaluation of the antiviral activity of methanolic root-bark extract of the African Baobab (Adansonia digitata Lin) // African journal of Biotechnology. – 2011. – Vol. 10, No. 20. – P. 4256–4258. DOI: 10.5897/AJB10.2225

38. Енгашев С.В., Сидорин Д.Н., Рогова Н.В., Ремизова Н.Ю., Енгашева И.В. Патент № 2494750 C1 Российская Федерация, МПК A61K 35/12. Способ получения стабилизированной формы антисептика-стимулятора Дорогова – фракции 2 (АСД-2): № 2012125647/15: заявл. 20.06.2012: опубл. 10.10.2013; заявитель Общество с ограниченной ответственностью «Научно-внедренческий центр Агроветзащита». EDN: ASPHZO.

39. Кукес В.Г., Енгашев С.В., Гребенникова Т.В., Енгашева Е.С., Дорогова О.А. Патент № 2796748 C1 Российская Федерация, МПК A61K 35/32, A61P 31/12, A61P 31/14. Средство, обладающее противовирусной активностью в отношении вирусов гриппа А и SARS-CoV-2: № 2022116189: заявл. 16.06.2022: опубл. 29.05.2023; заявитель Общество с ограниченной ответственностью «Научно-внедренческий центр Агроветзащита». EDN: KIUPDM.

40. Енгашев С.В., Кукес В.Г., Поддубиков А.В., Cидоров Н.Г., Парфенова О.К., Леонова А.Ю., Дорогова О.А. Оценка противомикробной активности АСД-2Ф // Инфекционные болезни. – 2021. – Т. 19, № 3. – C. 104–108. DOI: 10.20953/1729-9225-2021-3-104-108

41. Енгашев С.В., Кукес В.Г., Поддубиков А.В., Сидоров Н.Г., Леонова А.Ю., Парфенова О.К., Газданова А.А., Дорогова О.А. Изучение влияния «Антисептика стимулятора Дорогова» (АСД 2Б-капли) на рост штамма Mycobacterium tuberculosis // Человек и его здоровье. – 2023. – Т. 26, № 4. – С. 88–92. DOI: 10.21626/vestnik/2023-4/08