МОРФОМЕТРИЧЕСКОЕ И ГИСТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ТРАВЫ МЕЛИССЫ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ИЗ КОЛЛЕКЦИИ НИКИТСКОГО БОТАНИЧЕСКОГО САДА

В статье представлены результаты морфолого-анатомического, морфометрического и гистохимического исследования надземной части мелиссы лекарственной (Melissa officinalis L.), селекционного сортообразца из коллекции Никитского ботанического сада – Национального научного центра (НБС-ННЦ) РАН, Республика Крым. Получены данные по морфологии, гистохимии и морфометрии основных диагностических микроскопических признаков травы Melissa officinalis L., которые имеют определяющее значение для установления подлинности лекарственного растительного сырья, а также показывают локализацию секреции метаболитов и гетерогенную природу эфирного масла мелиссы.

Цель. Определение микродиагностических признаков и их биометрических характеристик травы мелиссы лекарственной сортообразца, интродуцированного в Никитском ботаническом саду, изучение возможности применения гистохимических реакций для анализа тканей и секреторных структур исследуемого вида.

Материалы и методы. Растительный материал предоставлен лабораторией лекарственных растений НБС-ННЦ. Изучение микроскопических признаков, морфометрических характеристик, а также гистохимические тесты проводили согласно методикам Государственной фармакопеи Российской Федерации XIII издания с помощью светового микроскопа Микромед-1, люминесцентного микроскопа Микромед 3 ЛЮМ и цифровой камеры Digital Eyepiece microscope camera MD 3.2. Фотографии редактировали в программе Paint.NET.3.5.11.

Результаты. Основными диагностическими микроскопическими признаками травы сортообразца Melissa officinalis L. можно назвать: эпидермальные конусовидные одноклеточные волоски, простые многоклеточные волоски, головчатые волоски с многоклеточной ножкой и воронковидной головкой и с одноклеточной ножкой и шаровидной головкой, эфиромасличные железки радиального типа с 6–8 выделительными клетками. Данные признаки диагностируются и в измельченном сырье. Проведена количественная оценка морфологических и анатомических признаков листа (толщина листовой пластинки, высота клеток верхнего и нижнего эпидермиса, плотность устьиц на 1 мм² эпидермы), стебля, чашечки и венчика, проанализированы размеры клеток, устьиц, трихом, а также частота расположения трихом. Гистохимическими методами с помощью световой и флуоресцентной микроскопии изучено присутствие и локализация в тканях и трихомах сырья липидов, полисахаридов, фенольных соединений, флавоноидов, эфирного масла, терпеноидов, алкалоидов.

Заключение. В ходе морфолого-анатомического исследования травы сортообразца мелиссы лекарственной из коллекции Никитского ботанического сада выявлены диагностически значимые микроскопические признаки сырья, установлены их биометрические характеристики. Впервые гистохимическими методами в тканях и секреторных структурах травы изучена локализация характерных секретируемых биологически активных веществ. Результаты экспериментальных исследований дополняют данные научной литературы и могут быть использованы для подтверждения подлинности, идентификации и стандартизации надземной части данного сортообразца.

1. Марко Н.В., Хлыпенко Л.А., Логвиненко Л.А., Работягов В.Д. Генофондовая коллекция ароматических и лекарственных растений Никитского ботанического сада / Роль ботанических садов в сохранении и мониторинге биоразнообразия: сб. науч. тр. – Ростов-на-Дону, 2015. – С. 226–229.

2. Исиков В.П., Работягов В.Д., Хлыпенко Л.А., Логвиненко И.Е., Логвиненко Л.А., Кутько С.П., Бакова Н.Н., Марко Н.В. Интродукция и селекция ароматических и лекарственных культур. Методологические и методические аспекты. – Ялта: НБС–ННЦ, 2009. – 110 с.

3. Растительные ресурсы СССР. Цветковые растения, их химический состав, использование. Т. 6. Семейства Hippuridaceae – Lobelaceae. – Наука, 1991. – 200 с.

4. Shakeri A., Sahebkar A., Javadi B. Melissa officinalis L. – A review of its traditional uses, phytochemistry and pharmacology // J Ethnopharmacol. – 2016. – Т. 184. – С. 204–228. DOI:10.1016/j.jep.2016.05.010.

5. Moradkhani H., Sargsyan E., Bibak H. Naseri B., Sadat-Hosseini M., Fayazi-Barjin A., Meftahizade H. Melissa officinalis L., a valuable medicine plant: a review // Journal of Medicinal Plants Research. – 2010. Т. 4, №25. – С. 2753–2759.

6. Куркин В.А., Запесочная Г.Г., Авдеева Е. В., Болтабекова З.В. Качественный и количественный анализ сырья и настойки мелиссы // Растительные ресурсы. – 1999. – Т. 35, №3. – С. 116–120.

7. Heitz A., Carnat A., Fraisse D., Carnat A.P., Lamaison J.L. Luteolin 3′-glucuronide, the major flavonoid from Melissa officinalis subsp. officinalis // Fitoterapia. – 2000. – Т. 71, №2. – C. 201–202. DOI: https://doi.org/10.1016/S0367-326X(99)00118-5.

8. Mencherini T, Picerno P, Scesa C, Aquino R. Triterpene, antioxidant and antimicrobial compounds from Melissa officinalis // J Nat Prod. – 2007. – Т. 70, №12. – С. 1889–1894. DOI: 10.1021/np070351s.

9. Abdellatif F., Boudjella H., Zitouni A., Hassani A. Chemical composition and antimicrobial activity of the essential oil from leaves of Algerian Melissa officinalis L. // EXCLI J. – 2014, №13. – C. 772–781.

10. Кулагин О.Л., Куркин В.А., Додонов Н.С., Царёва А.А., Авдеева Е.В., Куркина А.В., Дремова Е.А., Сатдарова Ф.Ш. Антиоксидантная активность некоторых фитопрепаратов, содержащих флавоноиды и фенилпропаноиды // Фармация. – 2007, № 2. – С. 30–32.

11. Зузук Б.М., Куцик Р.В. Мелисса лекарственная (Melissa officinalis L.). Аналитический обзор // Провизор. – 2002, №1. – Режим доступа: http://www.provisor.com.ua/archive/2002/N1/art_36.php.

12. Проект ФС «Мелиссы лекарственной трава» (взамен ФС 42-3645-98): мат. по проектам общ. фармакоп. статей и фармакоп. статей. – Режим доступа: https//www.rosminzdrav.ru/61/11/materially-po-farmakopee.

13. Taiwo A.E., Leite F.B., Lucena G.M., Barros M., Silveira D., Silva M., Ferreira V. Anxiolytic and antidepressantlike effects of Melissa officinalis (lemon balm) extract in rats: Influence of administration and gender // Indian J Pharmacol. – 2012. – Т. 44, №2. – С.189–192. DOI: 10.4103/0253-7613.93846.

14. Feliu-Hemmelmann K., Monsalve F., Rivera C. Melissa officinalis and Passiflora caerulea infusion as physiological stress decreaser // Int J Clin Exp Med. – 2013. – Т. 6, №6. – С. 444–451.

15. Куркин В.А., Мазур Л.И. Алексеева А.В., Авдеева Е.В. Мелисса лекарственная: перспективы использования в педиатрии: монография. – Самара: Офорт, 2010. – 164 с.

16. Морохина С.Л.. Бобкова Н.В., Сорокина А.А. Морфолого-анатомическое изучение нового успокоительного сбора // Фармация. – 2012, №3. – С. 21–24.

17. Luno V., Gil L., Olaciregui M., Jerez R.A., de Blas I., Hozbor F. Antioxidant effect of lemon balm (Melissa officinalis) and mate tea (Ilex paraguensys) on quality, lipid peroxidation and DNA oxidation of cryopreserved boar epididymal spermatozoa // Andrologia. – 2014. – Т. 47, №9. – P. 1004–1011. DOI: 10.1111/and.12370.

18. Логвиненко Л.А., Хлыпенко Л.А., Марко Н.В. Ароматические растения семейства Lamiaceae для фитотерапии // Фармация и фармакология. – 2016. – Т. 4, №4. – С. 34–47. DOI: 10.19163/2307-9266-2016-4-4-34-47.

19. Weidner C., Rousseau M., Plauth A., Wowro S.J., Fischer C., Abdel-Aziz H., Sauer S. Melissa officinalis extract induces apoptosis and inhibits proliferation in colon cancer cells through formation of reactive oxygen species // Phytomedicine. – 2015. – Т. 22, №2. – С. 262–270. DOI: 10.1016/j.phymed.2014.12.008.

20. ОФС 1.5.3.0003.15. Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов. Государственная фармакопея РФ. 13-е издание, т. 2, Москва, 2015. – Режим доступа: http://193.232.7.120/feml/clinical_ref/pharmacopoeia_2/HTML/#379/z (дата обращения 01.03.2016).

21. ОФС.1.5.1.0002.15 «Травы» Государственная фармакопея РФ. 13-е издание, т. 2, Москва, 2015. – Режим доступа: http://193.232.7.120/feml/clinical_ref/pharmacopoeia_2/HTML/#272 (дата обращения 01.03.2016).

22. Федосеева Л.М., Кнауб Н.Н., Селигеева Т.Г. Гистохимический анализ листьев и корней лопуха большого (Arctium lappa L.), произрастающего на территории Алтайского края // Химия растительного сырья. – 2004, №1. – С. 61–64.

23. Разаренова К.Н., Бабушкина Е.В., Смирнов П.Д., Костина О.В., Муравник Л.Е. Гистохимия трихом официнальных представителей семейства Lamiaceae // Медицинский альманах. – 2017, № 3. – С. 193–198. DOI: http://dx.doi.org/10.21145/2499-9954-2017-3-193-198.

24. Селиванов Е.В. Красители в биологии и медицине. Справочник. – Барнаул: Азбука, 2003. – 40 с.

25. Chwil M., Nurzynska-Wierdak R., Chwil S., Matraszek R., Neugebauerovа J. Histochemistry and micromorphological diversity of glandular trichomes in Melissa officinalis L. leaf epidermis // Acta Sci Pol Hortorum Cultus. – 2016. – Т. 15, №3. – С. 153–172.

26. Hassan E.A., El-Awadi M.E.. Brief review on the application of histochemical methods in different aspects of plant research // Nat Sci. – 2013. – Т. 11, №12. – С. 54–67.

27. Liu M.Q., Liu J.F. Structure and histochemistry of the glandular trichomes on the leaves of Isodon rubescens (Lamiaceae) // African Journal of Biotechnology. – 2012. – Т. 11, №17. – С. 4069–4078. http://dx.doi.org/10.5897/AJB11.4024.

28. Самылина И.А., Аносова О.Г. Ермакова В.А., Бобкова Н.В., Фармакогнозия. Атлас. Учебное пособие: в 3-х т. – Т. 3. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 488 с.

29. Jia P., Gao T, Xin X. Changes in structure and histochemistry of glandular trichomes of Thymus quinquecostatus Celak // The Scientific World Journal – 2012. – Т. 2012. – С. 1–7. DOI: http://dx.doi.org/10.1100/2012/187261.

30. Chwil M.; Nurzyńska-Wierdak R.; Chwil S.; Matraszek R.; Neugebauerová J. Histochemistry and micromorphological diversity of glandular trichomes in Melissa officinalis L. leaf epidermis // Acta Sci Pol Hortorum Cultus. – 2016. – Т. 15, № 3. – С. 153–172.

31. Marin M, Budimir S, Janošević D, Marin PD, Duletić-Laušević S, Ljaljević-Grbić M. Morphology, distribution, and histochemistry of trichomes of Thymus lykae Degen & Jav. (Lamiaceae) // Arch Biol Sci, Belgrade. – 2008. – Т. 60, №4. – С. 667–672. DOI: http://dx.doi.org/10.2298/ABS0804667M.